Кроличье моноклональное антитело против FTO для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦК, ИП, ИФА - Q9C0B1

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация FTO

• FTO (белок, ассоциированный с жировой массой и ожирением) — это альфа-кетоглутарат-зависимая диоксигеназа, функционирующая как РНК-деметилаза. Также известна как ALKBH9, относится к семейству диоксигеназ AlkB.
• Опосредует окислительное деметилирование N6-метиладенозина (m6A) в мРНК — наиболее распространенной внутренней модификации у высших эукариот, тем самым регулируя экспрессию и стабильность мРНК. Связанные ссылки: PMID:22002720, PMID:25452335, PMID:26457839, PMID:30197295
• FTO также деметилирует N6,2'-O-диметил-аденозин (m6Am) в кэпах мРНК, влияя на стабильность мРНК путем стимулирования декаппинга, и действует на m6A в U6 мяРНК. Связанные ссылки: PMID:28002401, PMID:30197295
• Функционирует как тРНК-деметилаза, удаляя N1-метиладенин, и обладает низкой активностью в отношении репарации алкилированной ДНК/РНК, хотя ее роль in vivo в репарации ДНК неясна. Связанные ссылки: PMID:30197295, PMID:18775698, PMID:20376003
• Субклеточная локализация преимущественно ядерная, с присутствием в ядерных спеклах и цитоплазме.
• FTO экспрессируется повсеместно, с высоким уровнем экспрессии в надпочечниках, головном мозге (гипоталамус и гипофиз) и сверхэкспрессируется при некоторых формах острого миелоидного лейкоза со специфическими генетическими изменениями. Связанные ссылки: PMID:17434869, PMID:17496892, PMID:28017614
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, фосфорилирование и убиквитин-подобную конъюгацию, которые могут регулировать ее активность и стабильность.
• Играет ключевую роль в регуляции жировой массы, адипогенеза, массы тела и энергетического гомеостаза, а также участвует в термогенезе и дифференцировке адипоцитов. Связанные ссылки: PMID:18775698, PMID:20376003, PMID:26287746
• Онкогенная роль при остром миелоидном лейкозе путем деметилирования m6A на транскриптах онкогенов, таких как MYC, CEBPA, ASB2 и RARA, способствуя их экспрессии. Связанные ссылки: PMID:28017614, PMID:29249359

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является пептид из N-концевой области (аа 1-100), который может детектировать полноразмерный FTO и, возможно, некоторые изоформы. Включайте положительный и отрицательный контроли (например, лизаты с сверхэкспрессией FTO или образцы, обработанные siRNA) для подтверждения специфичности.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) используйте восстановленные и денатурированные белковые образцы; ожидаемый размер полосы ~58 кДа. Используйте соответствующие контроли загрузки и условия блокирования.
• При ИГХ-П и ИФ/ИЦК тестируйте различные методы фиксации и демаскировки антигена. Для парафиновых срезов может потребоваться тепловая демаскировка эпитопов. Валидируйте окрашивание с использованием известных положительных тканей (мозг, надпочечники) и включайте контроли изотипа.
• Для иммунопреципитации (ИП) антитело может быть пригодно для захвата нативных комплексов FTO. Оптимизируйте условия лизирующего буфера и количество антител на заданное общее количество белка.
• Для ИФА антитело может использоваться как в прямом, так и в сэндвич-формате; оптимизируйте условия иммобилизации и детекции в соответствии с вашими конкретными требованиями к анализу.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам единую точку доступа к сырьевым материалам для ИВД. Это антитело против FTO поддерживает исследования в области ожирения, метаболизма и острого миелоидного лейкоза. Являясь вашим мостом для поставок, CamelBio предлагает валидированные пары антител, оптимизированные рекомбинантные белки, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальные решения по сырью для ускорения разработки ваших диагностических средств — от концепции до клиники.