Поликлональное антитело против FH (Фумаратгидратазы) для Вестерн-блоттинга, ИФА - P07954

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация FH (Фумаратгидратазы)

• FH катализирует обратимое гидратирование фумарата в L-малат в цикле Кребса, ключевой этап в митохондриальном производстве энергии (PubMed:30761759). Связанные ссылки: PMID:30761759

• Цитозольные изоформы FH участвуют в цикле мочевины и метаболизме аргинина, производя фумарат в качестве побочного продукта (По сходству).

• FH аннотирован как белок-супрессор опухолей и белок с вариантами, связанными с заболеваниями; мутации связаны с наследственными онкологическими синдромами, такими как HLRCC.

• В ответ на повреждение ДНК FH фосфорилируется PRKDC и транспортируется в ядро, где способствует репарации NHEJ, ингибируя деметилазу KDM2B, что приводит к увеличению H3K36me2 в сайтах двухцепочечных разрывов (PubMed:20231875, PubMed:26237645). Связанные ссылки: PMID:20231875, PMID:26237645

• FH локализуется в основном в митохондриях, но также и в цитозоле; накопление в ядре происходит после повреждения ДНК (PubMed:26237645).

• Альтернативная инициация транскрипции приводит к образованию различных изоформ, которые могут предпочтительно катализировать либо реакции гидратации, либо дегидратации (Вероятно).

• FH экспрессируется в эритроцитах, и его экспрессия снижена у пациентов с наследственной несфероцитарной гемолитической анемией неизвестной этиологии.

• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование и фосфорилирование; фосфорилирование, опосредованное PRKDC в сайтах двухцепочечных разрывов, критически важно для его роли в репарации ДНК.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 50–150 человеческого FH; для Вестерн-блоттинга рассмотрите возможность использования положительных контролей, таких как лизаты HeLa или HEK293T.
• При Вестерн-блоттинге должна наблюдаться специфичная полоса около 55 кДа; используйте соответствующие контроли загрузки и маркеры молекулярной массы.
• Субклеточное фракционирование может улучшить детекцию митохондриальных или ядерных пулов FH.
• Для ИФА оптимизируйте концентрацию иммобилизованного антигена и титрование антител для достижения наилучшего соотношения сигнал/шум.
• Перекрестная реактивность с FH мыши и крысы позволяет проводить исследования на нескольких видах; валидируйте в вашей экспериментальной системе.
• Предварительная адсорбция с иммунизирующим пептидом может подтвердить специфичность полосы.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio — это надежный партнер для производителей диагностических систем и исследовательских лабораторий, предлагающий единую точку доступа к сырьевым материалам для ИФА и техническую поддержку от концепции до клиники. Обладая опытом в валидации пар антител, оптимизированных моноклональных и поликлональных антител, а также объемных вспомогательных реагентов, мы можем оптимизировать ваши исследования, сфокусированные на FH, в области метаболизма рака и митохондриальных заболеваний. Независимо от того, нужны ли вам антитела к редким мишеням или полные наборы реагентов, CamelBio предоставляет надежные, масштабируемые решения по поставкам, адаптированные под ваш процесс разработки.