Поликлональные антитела против FBXL5 для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - Q9UKA1

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация FBXL5

• FBXL5 (белок 5, содержащий F-box и повторы LRR) является компонентом E3 убиквитин-лигазного комплекса SCF (SKP1-cullin-F-box). Он регулирует гомеостаз железа, направляя IREB2/IRP2 на убиквитинирование и деградацию. Связанные ссылки: PMID:19762596, PMID:19762597
• N-концевой гемэритрин-подобный домен (Hr) содержит дижелезный металлический центр, который действует как датчик железа. При низком уровне железа FBXL5 нестабилен; связывание железа стабилизирует белок. Связанные ссылки: PMID:19762596, PMID:19762597
• C-концевой домен содержит чувствительную к окислительно-восстановительному состоянию [2Fe-2S] кластер, который при окислении позволяет FBXL5 рекрутировать IRP2 для деградации кислородзависимым образом. Связанные ссылки: PMID:32126207
• FBXL5 также убиквитинирует компонент динактинового комплекса DCTN1, способствуя его деградации. Связанные ссылки: PMID:17532294
• В ядре FBXL5 убиквитинирует фактор транскрипции SNAI1, предотвращая его связывание с ДНК и способствуя деградации. Связанные ссылки: PMID:24157836
• FBXL5 отрицательно регулирует реакцию на повреждение ДНК, опосредуя деградацию белка репарации ДНК NABP2. Связанные ссылки: PMID:25249620
• Он локализуется преимущественно в цитоплазме и околоядерной области, но также перемещается в ядро. Его домены включают лейцин-богатые повторы и железо-серные кластеры.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию множества изоформ, что подтверждается данными протеомики и референсным протеомом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 1–310, соответствующие N-концевому гемэритрин-подобному домену и F-box домену, которые эволюционно консервативны у человека, мыши и крысы. Этот регион, вероятно, объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность.
• Для вестерн-блоттинга (WB) учитывайте теоретическую молекулярную массу около 79 кДа (UniProt) или указанную поставщиком 79 кДа. Подтвердите размер полосы в вашей конкретной матрице образца и проверьте специфичность сигнала с помощью соответствующих контролей (например, лизатов с нокдауном или нокаутом).
• В применениях ИФА (ELISA) поликлональная природа может позволить обнаружение как нативного, так и денатурированного целевого белка. Оптимизируйте условия покрытия и детекции эмпирическим путем.
• Обратите внимание, что FBXL5 подвергается альтернативному сплайсингу; поэтому в WB могут быть обнаружены несколько полос. Проверьте профиль реактивности антител в соответствующей ткани или клеточной линии.
• Как и в случае с любыми поликлональными антителами, следует проверить согласованность между партиями, и мы рекомендуем проведение тестов на преадсорбцию, если для вашего анализа требуется высокая специфичность.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный доступ к реагентам для IVD, техническим услугам и консультациям — охватывая все этапы от концепции до клиники. Для исследований FBXL5, сосредоточенных на убиквитинировании, метаболизме железа или путях репарации ДНК, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поиск сырья для редких мишеней для ускорения разработки вашей диагностики.