Кроличья поликлональная антитела против ERK2 для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - P28482

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация ERK2

• ERK2 (MAPK1) — это серин/треониновая киназа и важнейший компонент сигнального каскада MAPK/ERK, который вместе с ERK1 (MAPK3) регулирует разнообразные клеточные процессы, включая рост, адгезию, выживание и дифференцировку, путем фосфорилирования более 160 субстратов. Связанные ссылки: PMID:35831023
• Киназа фосфорилирует широкий спектр мишеней в цитоплазме, ядре и органеллах, таких как факторы транскрипции (ATF2, ELK1, FOS), цитоскелетные белки (MAP2, CTTN), регуляторы апоптоза (BAD, MCL1) и контролеры трансляции (EIF4EBP1), тем самым координируя экспрессию генов, динамику цитоскелета и апоптоз.
• В условиях гипоксии ERK2 фосфорилирует PGK1 в митохондриях, подавляя образование ацетил-кофермента А из пирувата (PubMed:26942675). Связанные ссылки: PMID:26942675
• ERK2 также функционирует как репрессор транскрипции, связываясь с консенсусными последовательностями [GC]AAA[GC] для подавления индуцированных интерфероном гамма генов, таких как CCL5, IRF7 и OAS1, независимо от своей киназной активности.
• Субклеточная локализация зависит от контекста: ERK2 обнаруживается в цитоплазме (ассоциирован с цитоскелетом и веретеном деления), в ядре, на центросомах, в мембранных кавеолах и фокальных адгезиях, что отражает его разнообразные сигнальные роли.
• Ключевые посттрансляционные модификации включают фосфорилирование (мотив TEY в активационной петле), ацетилирование и убиквитинирование, что влияет на длительность сигнала и клеточную локализацию. Ключевые слова: Киназа, Серин/треониновая протеинкиназа, Фосфопротеин, Ацетилирование, Убиквитинирование и другие.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга прогнозируемая молекулярная масса составляет 41 кДа; рассмотрите возможность использования тотальных клеточных лизатов из клеток HeLa, HEK293 или Jurkat в качестве положительного контроля, так как ERK2 экспрессируется повсеместно.
• При иммуногистохимии (ИГХ-П) протестируйте ряд методов демаскировки антигена и разведений антител, поскольку локализация ERK2 может быть как ядерной, так и цитоплазматической; следует валидировать на подходящих срезах нормальной и опухолевой ткани.
• Для иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) оптимальные условия фиксации и пермеабилизации сохранят как ядерный, так и цитоскелетный сигнал ERK2; рассмотрите возможность двойного окрашивания с маркерами конкретных компартментов.
• Применение в ИФА может быть адаптировано для количественного детектирования; используйте в паре с захватывающим антителом против ERK2 и валидируйте на рекомбинантном белке и нативных образцах.
• Иммуноген находится в пределах остатков 200–300, в области, отличной от регуляторного мотива TEY; это антитело может распознавать как фосфорилированный, так и нефосфорилированный ERK2 — при необходимости проверьте зависимость от фосфорилирования.
• Поскольку это поликлональное антитело, согласованность между партиями следует проверять для каждого применения; валидация методом нокаута (при наличии) подтверждает специфичность к мишени.

CamelBio: Ваш мост к надежным поставкам

CamelBio связывает производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории с высококачественными сырьевыми материалами для IVD, нацеленными на ERK2 и связанные мишени пути MAPK/ERK. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также услуги по поиску сырья для редких мишеней. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы оптимизировать разработку ваших тест-систем и обеспечить надежные поставки от концепции до клиники.