Поликлональное антитело против EPS8 для вестерн-блоттинга и ИФА — Q12929

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация EPS8

• EPS8 (субстрат 8 киназы рецептора эпидермального фактора роста) — это сигнальный адаптерный белок, регулирующий динамику актинового цитоскелета и контролирующий такие процессы, как миграция клеток и функционирование дендритных клеток. Изначально он был идентифицирован как субстрат киназы рецептора EGF.
• Белок функционирует в составе тримерного комплекса с SOS1 и ABI1, передавая сигналы от Ras к Rac посредством активации специфичной для Rac активности GEF и связывая сигналы факторов роста с перестройкой актина.
• EPS8 обладает двойной активностью, регулирующей актин: кэпирование заострённых концов при связывании с ABI1 (ингибирование подвижности) и связывание актиновых филаментов в пучки при взаимодействии с BAIAP2, что способствует образованию филоподий и мембранных выростов.
• В нейронах EPS8 отрицательно регулирует образование аксональных филоподий посредством кэпирования актина; однако фосфорилирование, индуцированное BDNF, подавляет эту кэпирующую активность, обеспечивая рост филоподий.
• На кончиках стереоцилий волосковых клеток EPS8 образует комплекс с WHRN и MYO15A, необходимый для удлинения актинового стержня; мутации в EPS8 связаны с несиндромальной глухотой (DFNB102).
• На субклеточном уровне белок локализуется в кортикальном слое клеток, мембранных складках, конусах роста, стереоцилиях и синаптосомах, что соответствует его роли в динамических мембранных выростах, обусловленных актином.
• Белок содержит домен SH3 и подвергается фосфорилированию и убиквитинированию; опосредованная убиквитином деградация необходима во время фазы G2 для изменения формы клеток, связанных с прохождением клеточного цикла.
• Широко экспрессируется в различных тканях, включая мозг, сердце, лёгкие, печень, почки и поджелудочную железу, а также во многих эпителиальных и фибробластоподобных клеточных линиях.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевому участку (аминокислоты 1–200) человеческого EPS8, который включает часть домена SH3 и N-концевую область. Этот участок относительно консервативен у человека, мыши и крысы, что объясняет перекрёстную реактивность. При работе с другими видами рекомендуется провести выравнивание последовательностей.
• Для вестерн-блоттинга расчётная молекулярная масса составляет около 92 кДа (на основании UniProt: 91,9 кДа). Полосы могут наблюдаться вблизи этого размера; однако фосфорилирование или другие модификации могут вызывать небольшие смещения. Проводите валидацию с соответствующими положительными и отрицательными контролями.
• При использовании в ИФА применяйте хорошо охарактеризованный рекомбинантный белок EPS8 или клеточные лизаты линий с известным уровнем экспрессии. Поскольку EPS8 широко экспрессируется, выбирайте систему с умеренным или высоким уровнем экспрессии.
• Поскольку это поликлональное антитело, однородность между партиями может различаться; при смене партии рекомендуется проводить предварительные эксперименты, особенно для количественных анализов.

CamelBio: универсальный поставщик для ваших задач

CamelBio — надёжный универсальный поставщик сырья для ИВД, поддерживающий производителей диагностических систем, исследовательские лаборатории и институты на всех этапах — от разработки концепции до внедрения в клиническую практику. Наш ассортимент включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Для исследователей, занимающихся динамикой актина и биологией рака, это поликлональное антитело против EPS8 станет ценным инструментом, а CamelBio обеспечит надёжные поставки и техническую поддержку на протяжении всего процесса разработки.