Поликлональное антитело против EP300 для IHC-P, ELISA - Q09472

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гистоновой ацетилтрансферазы p300

• Гистоновая ацетилтрансфераза p300 (также известная как ассоциированный с E1A белок p300, KAT3B) — это крупный (~264 кДа) транскрипционный коактиватор, кодируемый геном EP300. Принадлежит к семейству ацетилтрансфераз p300/CBP, регулирующих структуру хроматина и экспрессию генов.
• p300 функционирует как гистоновая ацетилтрансфераза, ацетилируя все четыре коровых гистона в нуклеосомах (H2A, H2B, H3, H4). Это ацетилирование гистонов служит эпигенетической меткой для активации транскрипции, а также может создавать двойные ацетил-метильные метки (Kacme) на гистонах H3 и H4, ассоциированные с активным хроматином. Связанные ссылки: PMID:23415232 PMID:23934153 PMID:8945521 PMID:21131905 PMID:23911289 PMID:37731000
• Помимо гистонов, p300 ацетилирует множество негистоновых белков, включая факторы транскрипции (например, p53/TP53, ALX1, FOXO1, STAT3) и другие регуляторы (например, HDAC1, SIRT2), тем самым модулируя их стабильность, связывание с ДНК или ферментативную активность. Также участвует в ответе на повреждение ДНК, ацетилируя гистон H1 и PCNA. Связанные ссылки: PMID:11511361 PMID:15448695 PMID:15653507 PMID:12929931 PMID:18722353
• p300 проявляет универсальную ацилтрансферазную активность, используя различные ацил-КоА субстраты для катализа кротонилирования, бутирилирования, 2-гидроксиизобутирилирования, лактилирования, пропионилирования и изоникотинилирования гистонов, связывая метаболизм с состоянием хроматина. Связанные ссылки: PMID:17267393 PMID:25818647 PMID:29775581 PMID:31645732
• Субклеточная локализация включает ядро, цитоплазму и хромосомы. Ядерная p300 рекрутируется на промоторы специфическими факторами транскрипции и участвует в регуляции циркадных ритмов через взаимодействие с CLOCK/BMAL1. Связанные ссылки: PMID:14645221
• p300 является субстратом для различных посттрансляционных модификаций, включая ацетилирование, фосфорилирование, метилирование, цитруллинирование и убиквитинирование, которые тонко настраивают ее активность и взаимодействия. Ее бромодомен распознает ацетилированные лизины, а белок содержит цинк-пальцевые мотивы.
• В вирусном патогенезе p300 используется белком Tat ВИЧ-1 для облегчения провирусной транскрипции, а также взаимодействует с аденовирусным белком E1A, что связывает ее с клеточной трансформацией.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является рекомбинантный белок, охватывающий аминокислоты 940-1030 — область, которая может включать часть каталитического HAT-домена или другие функциональные регионы; такая конструкция может быть подходящей для детекции полноразмерной p300 и, возможно, для ее отличия от высокогомологичного CBP. Специфичность рекомендуется проверять с использованием моделей нокаута или нокдауна.
• Рекомендуемые производителем применения — IHC-P и ELISA. Для иммуногистохимии учитывайте условия демаскировки антигена и оптимизируйте концентрацию антитела для ядерного и цитоплазматического окрашивания. Для ELISA проводите валидацию с использованием рекомбинантного белка p300 в качестве стандарта.
• Из-за большого размера (264 кДа) при попытке использования в вестерн-блоттинге применяйте соответствующий электрофорез в геле (например, 6-8% SDS-PAGE) и увеличьте время переноса.
• Согласно данным производителя, перекрестно реагирует с p300 мыши и крысы, что позволяет использовать ее в моделях на грызунах. Тем не менее, подтверждайте реактивность на вашей конкретной ткани/клеточной линии.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio специализируется на предоставлении производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям широкого спектра сырья для IVD. Это поликлональное антитело против EP300 поддерживает исследования в области эпигенетики и регуляции транскрипции, а мы также можем поставить подобранные пары антител, рекомбинантные антигены и вспомогательные реагенты для оптимизации разработки ваших тест-систем. Нужны ли вам крупные партии или индивидуальные модификации, CamelBio служит мостом от концепции до клиники, предлагая эффективные поставки и техническую экспертизу.