Кроличье поликлональное антитело против EGFR [валидировано методом KD] для WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P00533

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация EGFR

• Рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), также обозначаемый как протоонкоген c-ErbB-1 и рецепторная тирозин-протеинкиназа erbB-1, кодируется геном EGFR (альтернативные названия: ERBB, ERBB1, HER1).
• Функционирует как рецепторная тирозинкиназа, связывающая лиганды семейства EGF (EGF, TGFA, AREG, EPGN, BTC, EREG, HBEGF) для индукции димеризации рецептора и его аутофосфорилирования, активируя тем самым основные нисходящие сигнальные пути, включая RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC, STAT и потенциально NF-κB (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029, PubMed:11116146). Связанные источники: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146
• Непосредственно фосфорилирует такие нисходящие эффекторные белки, как RGS16 (усиливая его ГТФазную активность и связывая его с сигнальным путём GPCR) и MUC1 (способствуя взаимодействиям с SRC и CTNNB1), а также положительно регулирует миграцию клеток посредством взаимодействия с CCDC88A/GIV (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955). Связанные источники: PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• Изоформа, образующаяся в результате альтернативного сплайсинга (изоформа 2), может функционировать как антагонист сигнального пути, опосредованного EGF.
• Субклеточная локализация включает клеточную мембрану, эндоплазматический ретикулум, аппарат Гольджи, ядро, эндосомы и секретируемые формы, что отражает динамический транспорт и сигнальные функции белка.
• Широко экспрессируется в тканях человека; изоформа 2 особенно часто обнаруживается при раке яичников.
• Классифицируется как протоонкоген, тирозин-протеинкиназа и трансмембранный гликопротеин; также служит рецептором клетки-хозяина для проникновения вируса гепатита C (HCV), способствуя интернализации вируса.
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование, гликозилирование, гидроксилирование, метилирование, пальмитоилирование и конъюгацию с убиквитиноподобными молекулами, согласно ключевым словам UniProt.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Иммуноген (аминокислоты 1021–1210) расположен во внутриклеточном C-концевом домене; поэтому антитело может выявлять как полноразмерный белок, так и C-концевые фрагменты. Проверьте специфичность на соответствующих клеточных лизатах или образцах тканей.
• При проведении вестерн-блоттинга ожидается полоса около 134 кДа; однако гликозилирование и фосфорилирование могут вызывать изменения электрофоретической подвижности. Используйте маркеры молекулярной массы и проводите валидацию с EGFR-положительными и EGFR-отрицательными контролями.
• Для IHC-P следует оптимизировать стандартные протоколы демаскировки антигенов (например, с использованием цитратного буфера, pH 6,0) и блокирования; протестируйте антитело на известных положительных (например, кожа, плацента) и отрицательных (например, нокаутных) тканях.
• В IF/ICC методы фиксации (PFA или метанол) влияют на мембранное окрашивание EGFR; рекомендуется параллельное выявление с использованием мембранного маркера.
• Для ELISA антитело можно использовать в качестве реагента для захвата или выявления; условия анализа (концентрация для нанесения, блокирование) требуют индивидуальной оптимизации.
• Перекрёстная реактивность подтверждена для образцов человека; при использовании на других видах необходимо независимо проверить реактивность из-за возможных различий в последовательности.

CamelBio: ваш универсальный источник поставок

CamelBio упрощает закупку сырья для ИВД, предлагая универсальную платформу для поставки валидированных антител, рекомбинантных белков и вспомогательных реагентов, а также технические консультации на всех этапах — от разработки концепции до внедрения в клиническую практику. Для исследований EGFR и разработки диагностических решений мы поставляем поликлональные антитела, моноклональные антитела и совместимые пары антител для поддержки исследований в области онкологии, инфекционных заболеваний и клеточной сигнализации. Свяжитесь с CamelBio, чтобы получить оптовые количества и услуги по индивидуальному подбору поставок для вашего проекта.