Кроличья поликлональная антитело к DR5/TRAILR2/TNFRSF10B для Вестерн-блота и ИФА — O14763

Основные спецификации и параметры продукта

Биологические особенности: Функция и локализация DR5/TRAILR2/TNFRSF10B

• DR5/TRAILR2/TNFRSF10B является членом суперсемейства рецепторов фактора некроза опухоли, также известный как рецептор смерти 5 (DR5), KILLER и TRAIL-R2. Он кодируется геном TNFRSF10B, расположенным на хромосоме 8p21.3.
• Этот рецептор связывается с цитотоксическим лигандом TNFSF10/TRAIL, запуская апоптоз через привлечение адаптерного белка FADD и каспазы-8 с образованием индуцирующего смерть сигнального комплекса (DISC). Связанные публикации: PMID:10549288
• После формирования DISC каспаза-8 протеолитически активируется, инициируя каскад каспаз, который реализует апоптоз. Сигнализация через DR5 также активирует NF-kB, что связывает рецептор с путями выживания клеток.
• DR5 необходим для апоптоза, индуцированного эндоплазматическим стрессом, что подчеркивает его роль в ответах клеток на стресс.
• Данный белок является трансмембранным гликопротеином типа I, локализованным на плазматической мембране. Он содержит характерные внеклеточные цистеин-богатые домены и цитоплазматический домен смерти.
• DR5 широко экспрессируется в тканях взрослого организма и плода, при этом особенно высокая экспрессия наблюдается в опухолевых клеточных линиях (например, HeLa, K-562, HL-60, SW480, A-549, G-361), а также в сердце, печени, поджелудочной железе, селезенке, тимусе, предстательной железе, яичниках, матке, плаценте и кишечнике; в головном мозге он не обнаруживается.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, а белок подвергается посттрансляционным модификациям, включая гликозилирование и образование дисульфидных связей, которые критически важны для стабильности рецептора и его связывания с лигандом.

Рекомендации по эксперименту и технические советы

• Иммуноген, использованный для получения данной поликлональной антитела, соответствует аминокислотам 260–440 человеческого DR5/TRAILR2/TNFRSF10B, который охватывает внутриклеточный домен смерти и часть цитоплазматической области. Такая конструкция может быть подходящей для детекции как полноразмерной, так и расщепленной формы рецептора.
• Учитывая специфичность к человеческому DR5, при работе с нечеловеческими образцами исследователям следует отдельно валидировать перекрестную реактивность; продукт подтвержден для реакции с человеческим белком.
• Для Вестерн-блота (ВБ) клеточные линии с высокой экспрессией DR5 (например, HeLa, K-562, SW480) можно использовать в качестве положительного контроля, в то время как ткани головного мозга могут дать отрицательный результат. Рекомендуется использовать подходящие условия лизиса и восстановления, чтобы наблюдать полосу массой около 48 кДа.
• При использовании в ИФА может потребоваться оптимизация условий покрытия и детектирующей системы из-за мембранной локализации рецептора; в качестве мишеней для захвата можно исследовать рекомбинантный белок DR5 или лизаты клеток.
• Поскольку DR5 подвергается альтернативному сплайсингу и гликозилированию, в некоторых образцах может наблюдаться несколько полос или размывание. Использование дегликозилирующих ферментов или подтверждение с помощью нокдауна сиРНК помогает валидировать идентичность полосы.

CamelBio: ваш универсальный посредник по закупкам

CamelBio предоставляет производителям диагностических препаратов, лабораториям и научно-исследовательским институтам универсальный доступ к сырьевым материалам для ИВД, техническим услугам и консалтингу — покрывая все этапы от идеи до клинических испытаний. Данная поликлональная антитело к DR5/TRAILR2 является частью нашего обширного портфеля продуктов для исследований апоптоза и рака, поддерживая разработку ИВД за счет валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных/поликлональных антител, массовых вспомогательных реагентов и поиска сырьевых материалов для редких мишеней.