Кроличьи моноклональные антитела против DNMT3B для WB, ChIP, ELISA — Q9UBC3

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация DNMT3B

• DNMT3B — это ДНК (цитозин-5)-метилтрансфераза, которая катализирует de novo метилирование ДНК, формируя профили метилирования, критически важные для эмбрионального развития и клеточной дифференцировки.
• Она преимущественно метилирует нуклеосомную ДНК в ядровой области и может координировать метилирование ДНК с модификациями гистонов для регуляции структуры хроматина и экспрессии генов.
• Существует несколько альтернативно сплайсированных изоформ; изоформы 1, 3 и вероятно 2 являются функциональными, тогда как изоформы 4 и 5 не имеют консервативных мотивов метилтрансферазы и, скорее всего, каталитически неактивны.
• Помимо каталитической функции, DNMT3B работает как транскрипционный корепрессор за счет взаимодействия с CBX4 и ZHX1, опосредуя подавление генов независимо от метилирующей активности.
• В ассоциации с DNMT1 и фактором CTCFL/BORIS DNMT3B модулирует диметилирование гистонов H3K4 и H3K9 на промоторе BAG1, способствуя транскрипционной активации.
• DNMT3B необходим для подавления гена DUX4 в соматических клетках; его дизрегуляция связана с фасциоскапулогумеральной мышечной дистрофией типа 4 (FSHD4). Связанные источники: PMID:27153398
• Локализованный в ядре DNMT3B широко экспрессируется в организме: высокие уровни обнаружены в печени плода, сердце, почках и плаценте, а более низкие — в взрослых тканях, таких как мозг и скелетная мышца. Изоформа 1 отсутствует в мозге, скелетной мышце и периферических мононуклеарах крови.
• Посттрансляционные модификации, включая фосфорилирование и цитруллинацию, могут влиять на стабильность и активность DNMT3B; белок также подвергается конъюгации с убиквитиноподобными молекулами.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 206–360 человеческого DNMT3B, области, включающей часть домена PWWP; проверьте экспрессию функциональных изоформ в вашей системе образцов для гарантии детекции.
• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидайте полосу около 96 кДа; подтвердите специфичность с помощью контрольных образцов с нокаутом или нокдауном DNMT3B, так как некоторые изоформы могут мигрировать с другой молекулярной массой.
• Для иммунопреципитации хроматина (ChIP) тщательно оптимизируйте условия сшивания, разрывания и концентрацию антител, так как DNMT3B относится к ядерным белкам, ассоциированным с хроматином; обязательно включите подходящие негативные контрольные участки.
• В ELISA для оценки линейности построите стандартную кривую с рекомбинантным иммуногеном; антитело можно также использовать для захвата или детекции в сэндвич-ELISA с подобранными парами.
• Поскольку во многих тканях DNMT3B экспрессируется на низком уровне, для чувствительной детекции рекомендуется обогащение ядерной фракции или увеличение загрузки белка.
• Перекрестная реактивность с нечеловеческими видами не описана; если вы используете антитело не с человеческими образцами, проведите валидацию в соответствующей системе.

CamelBio: ваш единый центр подбора реагентов

CamelBio поддерживает ваши исследования в области эпигенетики и онкологии, предоставляя надежные антитела против DNMT3B и дополнительные сырьевые материалы для ИВД. Наша платформа предлагает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, крупные партии вспомогательных реагентов и подбор сырья для редких мишеней — все это сопровождается техническими консультациями для беспроблемной разработки анализов от концепции до клинического применения.