Поликлональное антитело против ДНК-полимеразы эта для Вестерн-блоттинга - Q9Y253

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация ДНК-полимеразы эта

• ДНК-полимераза эта (POLH), также известная как RAD30A или белок XP-V, представляет собой ДНК-полимеразу Y-семейства, специализирующуюся на транслезионном синтезе (TLS) через УФ-индуцированные циклобутановые пиримидиновые димеры и другие искажающие повреждения. Связанные ссылки: PMID:10385124, PMID:11743006, PMID:16357261
• Она взаимодействует с комплексом POLZ (REV3L-REV7-POLD2-POLD3) для удлинения праймеров после обхода повреждения, встраивая один или два нуклеотида напротив поврежденного участка. Связанные ссылки: PMID:24449906
• POLH направляет ДНК-полимеразу йота (POLI) в очаги репликации, способствуя скоординированному ответу на повреждение. Связанные ссылки: PMID:12606586
• На сайтах без основания (апуриновых/апиримидиновых) POLH образует основание Шиффа с 5′-дезоксирибозофосфатом, ковалентно связывая фермент и ингибируя его ДНК-синтезирующую активность, чтобы предотвратить мутагенез во время эксцизионной репарации оснований. Связанные ссылки: PMID:14630940
• Белок локализуется в ядре и накапливается в очагах репликации при повреждении ДНК.
• POLH подвергается убиквитинированию с образованием изопептидных связей, которые модулируют его рекрутинг и активность.
• Мутации в гене POLH ответственны за вариант пигментной ксеродермы (XP-V) — рецессивное заболевание, характеризующееся крайней чувствительностью к УФ-излучению и высоким риском рака кожи.
• Она также играет роль в соматическом гипермутагенезе генов иммуноглобулинов, способствуя разнообразию антител. Связанные ссылки: PMID:11376341, PMID:14734526

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует центральному региону (а.о. 322–520) человеческой POLH, который содержит консервативные домены, критически важные для полимеразной активности и обхода повреждений.
• При Вестерн-блоттинге (WB) ожидайте специфическую полосу приблизительно на уровне 78 кДа в ядерных лизатах клеточных линий человека, мыши или крысы.
• Для иммунофлуоресценции (IF/ICC) оптимизируйте фиксацию и пермеабилизацию для детекции ядерных фокусов, количество которых увеличивается после УФ-обработки.
• Для ELISA предварительно нанесите белок-иммуноген на планшет или используйте прямой метод иммобилизации, а также рассмотрите этап блокирования для минимизации фона.
• Валидируйте специфичность антитела на образцах с нокаутом гена или обработкой siRNA для подтверждения распознавания мишени.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам реагентов

CamelBio поддерживает разработчиков IVD и исследовательские группы, поставляя высококачественные исходные материалы для изучения повреждений и репарации ДНК. Это поликлональное антитело против POLH является частью широкого портфолио, которое включает валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты. Используйте интегрированные возможности CamelBio по поставкам и техническим консультациям, чтобы ускорить разработку анализов от открытия до клинического применения.