Кроличье моноклональное антитело против Anti-DNA-PKcs для Вестерн-блоттинга (WB), IP, IF/ICC, IHC-P, ИФА - P78527

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация DNA-PKcs

• DNA-PKcs (каталическая субъединица ДНК-зависимой протеинкиназы), также называемая DNPK1, p460, HYRC или XRCC7, кодируется геном PRKDC (ID гена: 5591) и служит каталической субъединицей комплекса DNA-PK.
• Будучи серин/треонин-протеинкиназой, она действует как молекулярный сенсор повреждений ДНК и необходима для негомологичного соединения концов (NHEJ), основного пути репарации двунитевых разрывов (DSB) и V(D)J-рекомбинации. Связывание с ДНК необходимо для ее каталитической активности; она рекрутируется белками XRCC5/Ku80 и XRCC6/Ku70 к концам ДНК, где защищает, выравнивает и изолирует сломанные концы для предотвращения деградации (PubMed:11955432, PubMed:12649176, PubMed:14734805). Связанные ссылки: PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805
• DNA-PKcs фосфорилирует многочисленные субстраты по консенсусному мотиву [ST]-Q, включая гистон H2AX в положении 'Ser-139' для регуляции ответа на повреждение ДНК (PubMed:14627815, PubMed:16046194), p53/TP53, XRCC4, XRCC5, XRCC6 и AKT1 в положении 'Ser-473' для стимулирования сигнализации выживания клетки (PubMed:10026262, PubMed:10467406, PubMed:11889123, PubMed:15262962). Связанные ссылки: PMID:14627815 PMID:16046194 PMID:10026262 PMID:10467406 PMID:11889123 PMID:15262962
• Помимо репарации DSB, DNA-PKcs участвует в поддержании теломер и предотвращает слияние хромосомных концов (По сходству).
• Она также модулирует транскрипцию (PubMed:11955432, PubMed:12649176, PubMed:14734805) и способствует ранней сборке рибосом, обрабатывая предшественник рРНК в зрелую 18S рРНК в процессоме малой субъединицы, взаимодействуя с U3 snoРНК (PubMed:32103174). Связанные ссылки: PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805 PMID:32103174
• В врожденном иммунитете DNA-PKcs регулирует путь cGAS-STING, фосфорилируя CGAS и PARP1, и является частью комплекса HDP-RNP, который активирует IRF3 (PubMed:28712728, PubMed:33273464, PubMed:35460603). Связанные ссылки: PMID:28712728 PMID:33273464 PMID:35460603
• Белок преимущественно локализуется в ядре и ядрышке, частично присутствует в цитозоле и подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 3993–4128 человеческого DNA-PKcs, C-концевую область; учитывайте расположение этого эпитопа при комбинировании с другими антителами или разработке стратегий детекции.
• Для Вестерн-блоттинга целевой белок имеет предсказанную молекулярную массу 469 кДа; обеспечьте использование соответствующего процента геля (например, 6% полиакриламида) и увеличенное время переноса для эффективного блоттинга.
• Хотя антитело валидировано для нескольких применений, оптимальные разведения должны быть определены эмпирически в экспериментальной системе конечного пользователя, начиная с диапазонов концентраций, рекомендованных в стандартных протоколах.
• Перекрестная реактивность подтверждена для образцов человека; для тканей или клеточных линий, не относящихся к человеку, перед использованием выполните выравнивание последовательностей между видами и проведите валидацию с соответствующими контролем.
• Поскольку DNA-PKcs является ядерным белком, скорректируйте этапы фиксации и пермеабилизации для иммунофлуоресценции или иммуногистохимии, чтобы обеспечить доступность антигена.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предлагает производителям диагностических средств и научно-исследовательским институтам комплексное решение «в одном окне» для закупки сырья для IVD, охватывающее все этапы от начальной разработки до клинического применения. Для таких целей, как повреждение и репарация ДНК, например DNA-PKcs, мы можем поставить валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реактивы оптом, а также осуществить поиск редких мишеней для ускорения разработки ваших анализов. Опираясь на мощные возможности цепочки поставок, наша цель — оптимизировать процесс закупки критически важного сырья.