Кроличье моноклональное антитело против DKK3 для Вестерн-блоттинга/Иммунофлуоресценции/Иммуноцитохимии/ИФА - Q9UBP4

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация DKK3

• DKK3 (белок 3, родственный Dickkopf), также известный как REIC или RIG, является секретируемым гликопротеином из семейства антагонистов Wnt Dickkopf. Он содержит сигнальный пептид, два богатых цистеином домена и спиральные спиральные (coiled-coil) области.
• DKK3 антагонизирует канонический сигнальный путь Wnt/β-катенина, связываясь с ко-рецепторами LRP5/6 и способствуя их интернализации через трансмембранные белки KREMEN, тем самым ингибируя взаимодействие лиганда Wnt с рецептором.
• Этот белок играет ключевую роль в эмбриональном развитии, включая формирование передне-задней оси, морфогенез конечностей, сомитогенез и формирование глаза, за счет локальной модуляции активности Wnt.
• В тканях взрослого организма DKK3 участвует в поддержании гомеостаза костной ткани, подавлении опухолевого роста (часто снижен в раковых клетках) и нейродегенеративных процессах, таких как болезнь Альцгеймера, хотя последние функции предполагаются на основе сходства.
• Субклеточная локализация исключительно внеклеточная: DKK3 секретируется во внеклеточное пространство и, по-видимому, не является мембраносвязанным или внутриклеточным.
• Наибольшая экспрессия наблюдается в сердце, головном и спинном мозге, с более низкими уровнями в других тканях, что указывает на тканеспецифичные регуляторные функции.
• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование и образование дисульфидных связей, что типично для секретируемых белков с цистеиновым узлом и может влиять на его стабильность и активность.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 200–350 человеческого DKK3, покрывая C-концевую область, богатую спиральными спиральными мотивами. Эта область может детектировать полноразмерный DKK3 и, возможно, некоторые продукты расщепления; проверьте молекулярную массу в вашей системе.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) предсказанная молекулярная масса составляет приблизительно 38 кДа (рассчитано по аминокислотной последовательности). Гликозилирование может приводить к тому, что наблюдаемая полоса будет мигрировать немного выше. Используйте соответствующие контроли.
• Для иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC), поскольку DKK3 является секретируемым белком, включение агента, блокирующего аппарат Гольджи (например, BFA), может усилить внутриклеточное окрашивание, если требуется задержка белка; в противном случае рассмотрите возможность анализа секретируемого DKK3 в супернатантах клеток с помощью ИФА.
• Антитело протестировано для применения в ИФА; его можно использовать для захвата антигена или детекции в зависимости от формата анализа. Проведите тесты на перекрестную реактивность с вашей конкретной матрицей.
• Несмотря на заявленную перекрестную реактивность с мышиным и крысиным белком, гомология последовательностей в области иммуногена высока; тем не менее, валидируйте реактивность в тканях конкретного вида.
• Всегда титруйте антитело в ваших условиях эксперимента для достижения оптимального соотношения сигнал/шум.

CamelBio: ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio выступает в качестве надежного партнера для комплексных поставок сырья для ИФА-диагностики, поддерживая производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории от концепции до клиники. Для мишеней пути Wnt, таких как DKK3, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и помощь в поиске редких мишеней. Позвольте нам оптимизировать ваш процесс разработки с помощью надежных, высококачественных материалов, адаптированных под ваши нужды.