Поликлональное антитело к DHFR для вестерн-блоттинга (WB) — P00374

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая характеристика: функция и локализация DHFR

• DHFR катализирует NADPH-зависимое восстановление 7,8-дигидрофолата до 5,6,7,8-тетрагидрофолата — критически важный этап одноуглеродного метаболизма. Связанные публикации: PMID:12096917 PMID:15039552 PMID:17569517
• Эта реакция необходима для синтеза тимидилата, глицина и пуринов de novo, обеспечивая предшественниками ДНК ядерный и митохондриальный геномы. Связанные публикации: PMID:21876188 PMID:22235121
• DHFR локализуется в цитоплазме, митохондриях и ядре, поддерживая метаболизм фолатов в различных клеточных компартментах.
• Фермент широко экспрессируется в тканях плода и взрослых, причём более высокие уровни отмечаются в головном мозге взрослых и цельной крови.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, а мутации в DHFR связаны с устойчивостью к метотрексату и вариантами, ассоциированными с заболеваниями.
• DHFR связывается со своей собственной мРНК, а также с мРНК DHFR2, что указывает на потенциальную регуляторную роль в посттранскрипционной экспрессии генов.
• Белок подвергается убиквитинированию и был идентифицирован в крупномасштабных протеомных исследованиях.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает полноразмерный человеческий DHFR (аа 1–187), что предполагает потенциальную реактивность с нативным белком у видов с высокой степенью гомологии (подтверждено для человека и мыши). Проверьте это в используемой экспериментальной системе.
• При проведении вестерн-блоттинга ожидайте полосу на уровне около 21 кДа. Оптимизируйте условия блокирования и детекции и включите соответствующие контроли загрузки.
• Для иммунофлуоресценции/ICC рассмотрите протоколы фиксации и пермеабилизации, сохраняющие локализацию DHFR в митохондриях и ядре.
• При выполнении ELISA в качестве антигенов могут использоваться рекомбинантно экспрессированный DHFR или клеточные лизаты; рекомендуется провести титрование антитела.
• Экспрессия DHFR варьируется в зависимости от ткани и стадии клеточного цикла; включите в эксперименты соответствующие положительные и отрицательные контроли.
• Поскольку это поликлональное антитело, оцените согласованность между сериями и рассмотрите возможность использования блокирующего пептида для подтверждения специфичности.

CamelBio: ваш универсальный мост к поставщикам

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским учреждениям оптимизированный канал поставок критически важных исходных материалов для ИВД. Мишень DHFR имеет большое значение для исследований метаболизма фолатов, онкологических и антимикробных исследований, и мы можем поставлять валидированные поликлональные антитела, оптимизированные пары антител и услуги по индивидуальной разработке и производству в соответствии с потребностями вашего проекта. Наша универсальная платформа охватывает все этапы — от концепции до клинического применения, обеспечивая стабильное качество и техническую поддержку.