Поликлональное антитело кролика Anti-DDX21 для WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA — Q9NR30

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация DDX21

• DDX21, также известный как нуклеолярная РНК-хеликаза 2, Gu-alpha и DEAD-box-белок 21, относится к семейству РНК-хеликаз DEAD-box с расчётной молекулярной массой около 87 кДа (UniProt: Q9NR30).
• В ядрышке DDX21 локализуется в участках рибосомной ДНК и непосредственно связывается с рРНК и малыми ядрышковыми РНК (snoRNA), способствуя транскрипции, процессингу и 2'-O-метилированию рРНК за счёт облегчения рекрутирования snoRNA. Связанные источники: PMID:25470060 , PMID:25477391
• В нуклеоплазме DDX21 связывается с РНК 7SK и рекрутируется к промоторам генов, транскрибируемых РНК-полимеразой II, где он зависимым от хеликазной активности образом способствует высвобождению P-TEFb из ингибирующего комплекса 7SK snRNP, тем самым усиливая транскрипцию. Связанные источники: PMID:25470060
• DDX21 действует как транскрипционный кофактор JUN и необходим для фосфорилирования JUN по Ser-77. Связанные источники: PMID:11823437 , PMID:25260534
• Белок обладает АТФ-зависимой активностью РНК-хеликазы (раскручивание двуцепочечной РНК) и активностью РНК-фолдазы (формирование вторичной структуры в одноцепочечной РНК). Связанные источники: PMID:9461305
• Деацетилирование с помощью SIRT7 активирует хеликазную функцию DDX21, позволяя ему преодолевать остановку РНК-полимеразы, опосредованную R-петлями, и предотвращать повреждение ДНК, связанное с транскрипцией. Связанные источники: PMID:28790157
• DDX21 является компонентом цитоплазматического мультихеликазного комплекса с TICAM1, который распознаёт вирусную двуцепочечную РНК и участвует во врождённом противовирусном иммунитете.
• На субклеточном уровне DDX21 преимущественно локализуется в ядрышке и нуклеоплазме, но при определённых условиях также может присутствовать в цитоплазме, цитозоле и митохондриях.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 1–180 вблизи N-конца DDX21. Поскольку это поликлональное антитело кролика, полученное против рекомбинантного слитого белка, оно может распознавать несколько эпитопов в этом регионе.
• При проведении вестерн-блоттинга (WB) в денатурирующих условиях ожидается полоса, соответствующая полноразмерному белку массой приблизительно 87 кДа. В качестве положительных контролей следует использовать лизаты клеточных линий человека или мыши с подтверждённой экспрессией DDX21.
• Преимущественная локализация DDX21 в ядрышке и нуклеоплазме делает это антитело подходящим для иммунофлуоресценции (IF/ICC) и иммуногистохимии (IHC-P). Может наблюдаться обогащение сигнала в ядре и точечное окрашивание ядрышка; для подтверждения рекомендуется использовать соответствующие маркеры органелл.
• Учитывая широкую РНК-связывающую активность и многодоменную структуру DDX21, эффективность антитела может зависеть от протоколов фиксации, пермеабилизации и демаскировки антигенов. Рекомендуется оптимизировать эти параметры для конкретного типа клеток или ткани.
• Для применения в ELISA антитело можно использовать в качестве реагента для захвата или детекции после стандартного титрования для определения оптимальных рабочих концентраций.

CamelBio: универсальный ресурс для поиска реагентов

CamelBio представляет собой комплексную универсальную платформу для поиска исходных материалов для IVD, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты в больших объёмах. Для исследователей, занимающихся процессингом рРНК, опосредованным DDX21, регуляцией транскрипции и врождённым противовирусным иммунитетом, мы обеспечиваем надёжный доступ к этому поликлональному антителу кролика Anti-DDX21 и можем помочь с поиском сопутствующих реагентов и поддержкой разработки анализов от концепции до клинического применения.