Поликлональные антитела к Anti-DDOST для Вестерн-блоттинга, ИГХ, ИФА - P39656

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация DDOST

• Идентификация белка и изоформы: DDOST кодирует субъединицу 48 кДа долихил-дифосфоолигосахарид-протеин-гликозилтрансферазы, также обозначаемую как OST48, WBP1, AGER1 и CDG1R. Альтернативный сплайсинг приводит к образованию множественных изоформ.
• Основная функция гликозилирования: Белок является незаменимой субъединицей комплекса олигосахаридтрансферазы (OST), который катализирует эн-блок перенос предварительно собранного высокоманнозного гликанa (Glc3Man9GlcNAc2) с долихол-пирофосфата на остатки аспарагина в растущих полипептидах внутри ЭПР (PubMed:31831667).
  Связанные ссылки:
  PMID:31831667
• Котрансляционный механизм: Активность OST сопряжена с транслокацией белка через сек61-транслокон, что позволяет N-гликозилированию происходить котрансляционно на люминальной стороне мембраны ЭПР.
• Сборка комплекса OST: DDOST требуется для сборки комплексов OST, содержащих как STT3A, так и STT3B, которые опосредуют ко- и посттрансляционное гликозилирование соответственно (PubMed:22467853).
  Связанные ссылки:
  PMID:22467853
• Субклеточная локализация: Белок является интегральным мембранным компонентом эндоплазматического ретикулума, обладающим сигнальным пептидом и множественными трансмембранными доменами.
• Клиническая значимость: Мутации в гене DDOST связаны с врожденными нарушениями гликозилирования, что подчеркивает его важность для здоровья человека и развития заболеваний.
• Молекулярный вес: Канонический полипептид DDOST имеет расчетную молекулярную массу около 50,8 кДа (UniProt), тогда как зрелый белок мигрирует при около 51 кДа в SDS-PAGE.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (рекомбинантный белок, покрывающий аминокислоты 40–300) соответствует люминальному домену человеческого DDOST, что, вероятно, приводит к выработке антител, распознающих как нативные, так и денатурированные эпитопы. Для Вестерн-блоттинга подходят денатурирующие и восстанавливающие условия.
• При выполнении ИГХ (IHC-P) retrieval антигена с помощью нагревания или ферментативной обработки может улучшить обнаружение; рекомендуется включение известной ткани положительного контроля, такой как печень или поджелудочная железа.
• Для ИФА антитела могут использоваться для прямого или сэндвич-обнаружения рекомбинантного или эндогенного DDOST в лизатах клеток и тканей. Сообщается о перекрестной реактивности с мышиным и крысиным DDOST, поэтому рекомендуется проводить титрационные эксперименты для каждого вида.
• Для оптимизации сигнала может потребоваться эмпирическое определение разведения антител. Начните с 1:500–1:2000 для Вестерн-блоттинга и 1:200 для ИГХ и корректируйте по мере необходимости.
• Поскольку DDOST является повсеместно экспрессируемым белком резидентом ЭПР, он может служить контролем загрузки или эталонным стандартом для исследований гликозилирования.

CamelBio: Ваш мост по закупкам полного цикла

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям комплексные поставки сырья для IVD, включая высококачественные антитела к DDOST для исследований в области гликобиологии и рабочих процессов контроля качества. Мы поддерживаем вашу разработку IVD, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные реагенты, вспомогательные материалы оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы оптимизировать переход от концепции к клинике.