Поликлональное антитело против DARS, полученное из кролика, для вестерн-блоттинга, IHC-P, IP, ELISA - P14868

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация DARS

• DARS, также известный как аспартил-тРНК-синтетаза (AspRS) и белок гена 40, индуцирующего пролиферацию клеток, кодируется геном DARS1 у человека. Он принадлежит к семейству аминоацил-тРНК-синтетаз класса II, которые играют фундаментальную роль в трансляции белков.
• Фермент катализирует специфическое присоединение аспартата к его когнатной тРНК в двухстадийной реакции: сначала аспартат активируется АТФ с образованием аспартил-АМФ, а затем переносится на акцепторный конец тРНК, что является критическим этапом для точного цитоплазматического синтеза белка.
• Преимущественно локализуясь в цитозоле, DARS необходим для обеспечения рибосомальной трансляции аспартил-тРНК, напрямую влияя на поддержание клеточного протеома и рост.
• Анализ тканеспецифической экспрессии показывает высокие уровни в развивающемся и взрослом мозге, особенно в желудочковой/субвентрикулярной зонах, полях гиппокампа и коре головного мозга, с преимущественной нейрональной экспрессией. Периферические нейроны в толстой кишке также экспрессируют DARS.
• Протеомные исследования выявили ацетилирование и фосфорилирование DARS — посттрансляционные модификации, которые могут модулировать его ферментативную активность, субклеточное распределение или белок-белковые взаимодействия.
• Патогенные мутации в DARS связаны с лейкоэнцефалопатией с вовлечением ствола мозга и спинного мозга и повышением лактата (HBSL), тяжелым неврологическим расстройством, что подчеркивает критическую роль этого фермента в центральной нервной системе.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Последовательность иммуногена (а.о. 222–501) находится в пределах консервативного каталитического домена DARS; этот регион имеет высокую идентичность у человека, мыши и крысы, что подтверждает наблюдаемую перекрестную реактивность.
• Для вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса составляет ~57 кДа. Рекомендуется валидировать антитело с использованием позитивных контролей, таких как лизаты HeLa, HEK293 или мозга мыши/крысы, а также учитывать как восстанавливающие, так и невосстанавливающие условия.
• При иммуногистохимии (IHC-P) оптимальное извлечение антигена и разведение антитела следует определять эмпирически. DARS высоко экспрессируется в тканях мозга; таким образом, для первоначальной валидации рекомендуются срезы мозга человека или грызунов.
• При проведении иммунопреципитации поликлональная природа антитела может улучшить захват нативных комплексов DARS. Включите соответствующие изотипические контроли и этапы предварительной очистки для снижения фона.
• Для применения в ELISA это антитело может использоваться в качестве захватывающего или детектирующего реагента. Рекомендуются титрование и анализы на перекрестную реактивность с близкородственными синтетазами для обеспечения специфичности.
• Модели нокдауна или нокаута могут служить негативными контролями для подтверждения специфичности антитела, особенно в количественных приложениях, где необходима точная количественная оценка.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio — это преданный партнер по поставкам сырья для IVD, предлагающий производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям беспрепятственный доступ к комплексному портфелю антител, антигенов и вспомогательных реагентов. Для таких белков, как DARS, которые имеют ключевое значение в неврологических исследованиях и путях биосинтеза белка, мы предоставляем валидированные поликлональные и моноклональные антитела, оптимизированные пары антител и поставки реагентов оптом. Независимо от того, нужны ли вам сырье для редких мишеней, техническая консультация или поддержка в разработке анализов, CamelBio ускоряет ваш путь от концепции до клинического применения, предлагая надежный опыт комплексных поставок.