Кроличья поликлональная антитело против CXCL12/SDF-1 для Вестерн-блоттинга (WB), иммуногистохимии на парафиновых срезах (IHC-P), иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC), ELISA - P48061

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация CXCL12

• CXCL12, также известный как стромальный фактор, производный от клеток стромы 1 (SDF-1), является секретируемым хемокином семейства CXC, который существует в виде нескольких изоформ (альфа, бета, гамма, дельта, эпсилон, тета) из-за альтернативного сплайсинга.
• CXCL12 функционирует как хемоаттрактант для T-лимфоцитов и моноцитов, но не для нейтрофилов, связываясь и активируя рецептор CXCR4, что приводит к быстрой мобилизации внутриклеточного кальция и направленной миграции клеток. Связанные ссылки: PMID:18802065, PMID:39093700, PMID:8752281
• Он также связывается с атипичным хемокиновым рецептором ACKR3 (CXCR7), который служит рецептором-мусорщиком и активирует сигнальный путь бета-аррестина. Связанные ссылки: PMID:16107333, PMID:19255243
• CXCL12 может активировать интегрины ITGAV:ITGB3, ITGA4:ITGB1 и ITGA5:ITGB1 через аллостерический сайт связывания, независимо от CXCR4. Связанные ссылки: PMID:29301984
• Он положительно регулирует миграцию моноцитов и отрицательно регулирует адгезию моноцитов посредством механизма, опосредованного киназой LYN, который ингибирует связывание LFA-1 с ICAM-1. Связанные ссылки: PMID:18802065
• Усеченная форма, SDF-1-альфа(3-67), демонстрирует сниженную хемотаксическую активность; связывание с протеогликанами клеточной поверхности ингибирует ее образование, тем самым сохраняя активность полноразмерного CXCL12 локально. Связанные ссылки: PMID:14525775
• Изоформы альфа и бета экспрессируются повсеместно с наибольшим уровнем в печени, поджелудочной железе и селезенке, в то время как изоформа гамма в основном экспрессируется в сердце, а изоформы дельта, эпсилон и тета демонстрируют наибольшую экспрессию в поджелудочной железе.
• Зрелый секретируемый белок содержит важные структурные особенности, включая два дисульфидных мостика и сигнальный пептид, с молекулярной массой приблизительно 11 кДа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 40–93 человеческого CXCL12 (NP_000600.1), области в пределах зрелого хемокинового домена; следовательно, ожидается, что антитело будет распознавать секретируемый белок. Для Вестерн-блоттинга готовьте образцы в восстанавливающих условиях и используйте стандартный протокол SDS-PAGE. Рассмотрите начальный диапазон разведений 1:500–1:2000 с последующей оптимизацией.
• Для IHC-P выполняйте тепловое демаскирование антигена и валидируйте окрашивание с соответствующими тканевыми контролями. CXCL12 секретируется, поэтому могут наблюдаться внеклеточные паттерны окрашивания.
• В IF/ICC рассмотрите возможность использования ингибитора секреции (например, брефельдина А) для усиления внутриклеточного сигнала; оптимизируйте условия фиксации/пермеабилизации. Антитело может маркировать аппарат Гольджи/секреторный путь.
• Антитело перекрестно реагирует с мышиным и крысиным CXCL12, что делает его пригодным для исследований на этих видах. Однако всегда подтверждайте специфичность в соответствующей модельной системе.
• Из-за альтернативного сплайсинга в WB могут обнаруживаться несколько полос; сравните с известными молекулярными массами изоформ (альфа ~11 кДа). Используйте положительный контроль (например, рекомбинантный CXCL12 или клеточные линии с высоким уровнем экспрессии) для проверки реактивности.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio специализируется на предоставлении комплексного доступа к высококачественным сырьевым материалам для IVD, поддерживая производителей диагностических систем и исследовательские институты от концепции до клиники. Это анти-CXCL12 кроличье поликлональное антитело является примером нашей приверженности поставке валидированных реагентов для исследований хемокинов и иммунологии. Мы предлагаем оптовые заказы, услуги по изготовлению антител на заказ и широкий спектр вспомогательных реагентов для оптимизации разработки ваших анализов.