Кроличье моноклональное антитело против CTCF для WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP, ChIP-seq, CUT&Tag — P49711

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация CTCF

• CTCF, также известный как связывающий CCCTC-фактор или 11-цинковый пальцевый белок, представляет собой хроматин-связывающий фактор, который связывается с последовательностно-специфичными сайтами ДНК и регулирует трехмерную структуру хроматина путем формирования петель и прикрепления ДНК к ядерным структурам. Связанные источники: PMID:16949368, PMID:18347100, PMID:18654629
• Он формирует границы между активной и гетерохроматиновой ДНК за счет связывания с хроматиновыми изоляторами, предотвращает взаимодействие промоторов с соседними энхансерами и сайленсерами, тем самым опосредуя дистанционное подавление генов. Связанные источники: PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• CTCF участвует в аллель-специфической экспрессии генов в импринтированном локусе IGF2/H19, опосредуя высшую организацию конформации хроматина и ограничивая доступ энхансера к IGF2 на материнском аллеле. Связанные источники: PMID:16107875, PMID:16815976, PMID:17827499
• Он играет ключевую роль в инактивации Х-хромосомы, формируя регулируемый эпигенетический переключатель и предотвращая распространение стабильной метилирования на генах, избегающих инактивации. Связанные источники: PMID:11743158
• CTCF локализован преимущественно в ядре и ассоциирован с центромерами и хромосомными плечами во время метафазы, где он необходим для локализации когезинов и когезии сестринских хроматид. Связанные источники: PMID:18550811, PMID:26321640
• Он действует как транскрипционный репрессор MYC и BAG1 и как транскрипционный активатор APP, что демонстрирует его двойные регуляторные функции. Связанные источники: PMID:8649389, PMID:9591631, PMID:9407128
• Белок содержит множество сайтов посттрансляционных модификаций, включая ацетилирование, фосфорилирование и сумоилизацию (изопептидная связь), которые регулируют его связывание с хроматином и транскрипционную активность.
• CTCF конститутивно экспрессируется во всех тканях человека, но заметно отсутствует в первичных сперматоцитах, что указывает на тканеспецифические регуляторные роли.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 628–727 C-концевой области человеческого CTCF — это домен, отличный от цинкопальцевой ДНК-связывающей области, что потенциально повышает специфичность антитела к эндогенному CTCF по сравнению с другими цинкопальцевыми белками.
• При вестерн-блоттинге ожидается полоса с молекулярной массой примерно 83 кДа; фактическая миграция может отличаться из-за посттрансляционных модификаций или условий электрофореза, поэтому всегда проводите валидацию с известным положительным контролем.
• Для иммунопреципитации хроматина (ChIP) и ChIP-seq оптимизируйте условия сшивания и сдвига хроматина для вашего типа клеток; включайте положительные (например, H19 ICR) и отрицательные контролегеномные участки для оценки обогащения.
• При проведении иммунофлуоресценции протоколы фиксации и пермеабилизации следует подобрать эмпирически для получения надежной ядерной окраски; можно наблюдать субклеточную локализацию в ядре и центромерах.
• Антитело подходит для CUT&Tag, являясь эффективной альтернативой ChIP-seq с более низким входом клеток; для получения оптимальных результатов рекомендуется валидация условий мечения ферментом и концентрации антитела.

CamelBio: ваш универсальный мост для закупок

CamelBio выступает в качестве вашего комплексного партнера по закупкам сырья для ИВД, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также крупные объемы вспомогательных реагентов для оптимизации разработки диагностических продуктов. Для исследований в области биологии хроматина и регуляции генов наше антитело к CTCF подходит для самых разных применений от фундаментальной науки до разработки клинических тестов. Свяжитесь с CamelBio для заказа кастомных антител, получения технической консультации или масштабируемых решений по поставкам.