Поликлональное антитело кролика к CRY2 для WB, IF/ICC, ELISA — Q49AN0

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация CRY2

• Криптохром-2 (CRY2) является основным компонентом циркадных часов и действует как транскрипционный репрессор в отрицательной ветви петли обратной связи транскрипции/трансляции (TTFL). Он взаимодействует с гетеродимером CLOCK/BMAL1 и ингибирует его транскрипционную активность.
• Совместно с CRY1 CRY2 регулирует продолжительность циркадного периода; хотя оба белка выполняют частично взаимозаменяемые функции, CRY2 обладает менее выраженной репрессорной активностью в мозжечке и печени и играет важную роль в настройке циркадного периода супрахиазматического ядра (SCN), противодействуя действию CRY1.
• CRY2 участвует в регуляции метаболизма глюкозы и липидов, подавляя экспрессию генов-мишеней PPARD в скелетных мышцах и регулируя такие гены, как LEP и ACSL4.
• Он подавляет транскрипционную активность, индуцированную глюкокортикоидным рецептором (NR3C1/GR), связываясь с элементами ответа на глюкокортикоиды, а также подавляет транскрипцию BHLHE40/DEC1 и NAMPT, индуцированную CLOCK-BMAL1.
• На субклеточном уровне CRY2 локализуется как в цитоплазме, так и в ядре, что позволяет ему перемещаться между этими компартментами в рамках регуляции циркадных часов.
• Посттрансляционные модификации, включая фосфорилирование и убиквитинирование, имеют критическое значение для определения циркадного периода (tau) и стабильности CRY2.
• CRY2 широко экспрессируется в тканях человека; наиболее высокие уровни обнаруживаются в сердце и скелетных мышцах, а также белок присутствует в мозге, печени, почках и многих других тканях.
• Белок связывает FAD и может обладать фоторецепторными свойствами, однако у млекопитающих его основная роль заключается в регуляции транскрипции в составе механизма циркадных часов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует С-концевому участку (аминокислоты 455–614), который может быть хорошо доступен в денатурирующих условиях; для вестерн-блоттинга рекомендуется использовать восстановительный SDS-PAGE для выявления полосы 67 кДа.
• Для иммунофлуоресценции/ICC оптимизируйте протоколы фиксации и пермеабилизации, поскольку CRY2 локализуется как в цитоплазме, так и в ядре; использование метанола или параформальдегида с Triton X-100 может давать разные результаты.
• ELISA можно использовать для количественного определения; рассмотрите вариант сэндвич-ELISA с парой совместимых антител и подтвердите линейность и чувствительность с использованием рекомбинантного белка CRY2.
• Перекрёстная реактивность подтверждена для образцов человека и крысы; при работе с другими видами выполните выравнивание последовательностей и проведите валидацию в соответствующей системе образцов.
• Включайте соответствующие положительные контроли (например, лизаты клеток HEK293 и HeLa) и отрицательные контроли (образцы после нокдауна с помощью siRNA или нокаута), чтобы подтвердить специфичность антитела.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по снабжению

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям широкий спектр сырья для IVD, включая валидированные антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты. Для исследований циркадных часов и транскрипции это анти-CRY2-антитело дополняет наш ассортимент антител к основным компонентам циркадных часов и инструментов для разработки тест-систем. В качестве надёжного партнёра по снабжению CamelBio оптимизирует закупки на всех этапах — от разработки концепции до клинического применения, предлагая поставки оптом, индивидуальное приготовление и техническую поддержку для ускорения реализации ваших диагностических или исследовательских проектов.