Кроличьи моноклональные антитела против COX5B для Вестерн-блоттинга - P10606

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация COX5B

• COX5B (субъединица 5B цитохром c оксидазы) — это кодируемая в ядре субъединица митохондриального комплекса IV (цитохром c оксидазы), терминального фермента электрон-транспортной цепи.
• Является компонентом мульти-субъединичного комплекса цитохром c оксидазы, который катализирует восстановление молекулярного кислорода до воды, сопрягая эту реакцию с перекачкой протонов через внутреннюю митохондриальную мембрану.
• Белок COX5B синтезируется с митохондриальным сигнальным пептидом, который отщепляется после импорта в митохондрию, в результате чего образуется зрелая субъединица, интегрирующаяся во внутреннюю мембрану.
• Субклеточная локализация ограничена внутренней митохондриальной мембраной, где белок способствует структурной и функциональной целостности комплекса IV.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, а в зрелом белке, судя по наличию иона цинка в кристаллической структуре, имеется сайт связывания цинка.
• Теоретическая молекулярная масса зрелого человеческого COX5B составляет приблизительно 13,7 кДа, что согласуется с наблюдаемой полосой 13 кДа при SDS-PAGE.
• Как основная субъединица дыхательной цепи, COX5B необходим для эффективного окислительного фосфорилирования и производства АТФ; его экспрессия часто используется как маркер митохондриальной массы и активности.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 29–129 человеческого COX5B, что соответствует зрелому процессированному белку, лишенному митохондриального сигнального пептида, что, вероятно, приводит к выработке антител, распознающих эндогенную процессированную форму.
• Для Вестерн-блоттинга ожидается полоса около 13 кДа в лизатах тканей человека, мыши и крысы, богатых митохондриями (например, сердце, скелетные мышцы, печень). Для оптимального обнаружения используйте образец с обогащенной митохондриальной фракцией.
• Для иммуногистохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) окрашивание должно демонстрировать пятнистый цитоплазматический рисунок, соответствующий митохондриальной локализации. Рекомендуется контрастное окрашивание митохондриальным маркером для валидации.
• В экспериментах по иммунопреципитации (IP) антитело может осаждать вместе другие субъединицы комплекса IV; рассмотрите возможность использования мягких детергентов для сохранения целостности нативного комплекса.
• Реактивность в ИФА может использоваться для количественного обнаружения COX5B в лизатах клеток или тканей, но характеристики должны быть подтверждены с использованием известных стандартов.
• Перекрестная реактивность с мышью и крысой подтверждена, но всегда проверяйте видоспецифичную реактивность в вашей собственной экспериментальной системе из-за возможных вариаций последовательности.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории комплексным портфелем реагентов для IVD, включая валидированные моноклональные антитела, такие как эти кроличьи mAb против COX5B, для исследований митохондрий и метаболических заболеваний. Мы предлагаем оптовые партии, разработку антител на заказ и вспомогательные реагенты для оптимизации разработки ваших анализов. Сотрудничайте с нами, чтобы обеспечить реагенты для редких мишеней, оптимизировать закупки и ускорить переход от концепции к клинике.