Моноклональное антитело против COX5B для WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10606

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация COX5B

• COX5B, также известный как субъединица 5B цитохром-соксидазы или COXVB, является ядерно-кодируемым компонентом комплекса IV (цитохром-соксидазы) митохондриальной электронтранспортной цепи.
• Он катализирует конечную реакцию восстановления молекулярного кислорода до воды, связывая перенос электронов с переносом протонов через внутреннюю митохондриальную мембрану для синтеза АТФ.
• Белок локализуется специфично во внутренней митохондриальной мембране, где ассоциируется с другими субъединицами полного фермента цитохром-соксидазы.
• Вместе с комплексами I, II и III COX5B участвует в работе дыхательной цепи, переносящей электроны от НАДН и сукцината к кислороду, создавая электрохимический градиент.
• Активный центр цитохром-соксидазы включает гем А3 и медь B (CuB), при этом COX5B выполняет структурную роль в поддержании целостности и функции бинеуклеарного центра.
• Пост-трансляционные модификации включают ацетилирование; как было установлено протеомными методами и прямым секвенированием белка, этот белок связывает ион цинка (обладает металлосвязывающей активностью).
• Зрелый белок ( после отщепления митохондриального транзитного пептида) имеет молекулярную массу примерно 14 кДа, что соответствует основной массе зрелой субъединицы.

Экспериментальные рекомендации и технические подсказки

• Иммуноген охватывает аминокислоты 29–129 человеческого COX5B — регион, соответствующий зрелому белку после удаления митохондриальной сигнальной последовательности; такая конструкция увеличивает эффективность распознавания эндогенной обработанной формы белка.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рекомендуется использовать восстанавливающие условия и обогащенные митохондриями экстракты белка для максимального детектирования полосы размером ~14 кДа.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) и иммуногистохимии (IHC-P) окрашивание на COX5B обычно имеет пятнистый митохондриальный паттерн; для подтверждения локализации используйте маркеры органелл.
• Антитело перекрестно реагирует с COX5B мыши и крысы; проверяйте реактивность в лизатах клеток или тканей соответствующего вида, поскольку гомология последовательности в регионе иммуногена может варьироваться.
• Для приложений в ИФА оптимизируйте условия покрытия и разведения антитела с использованием рекомбинантного COX5B или митохондриальных фракций образцов человека, мыши или крысы.
• Будучи моноклональным антителом, оно обеспечивает стабильные результаты от партии к партии; тем не менее, для каждого нового применения следует провести титрование и валидацию в используемой системе образцов.

CamelBio: ваш универсальный партнер по закупке реагентов

CamelBio упрощает закупку сырья для производства ИВД для разработчиков диагностических систем и исследовательских лабораторий, предлагая валидированные моноклональные антитела, такие как этот клон против COX5B, наряду с широким ассортиментом реагентов для исследования митохондрий. Наша цепочка поставок охватывает крупные партии пар антител, вспомогательные реагенты и поиск реагентов к редким мишеням — все это сопровождается техническими консультациями на всех этапах от идеи до клинических испытаний. Независимо от того, нужны ли вам оптимизированные иммунореагенты для исследований окислительного фосфорилирования или поддержка масштабируемого производства, CamelBio преодолевает разрыв между открытием и внедрением диагностики.