Кроличье моноклональное антитело против комплемента C4A для вестерн-блоттинга, иммунофлуоресценции (IF-P), ELISA - P0C0L4

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация комплемента C4-A

• Комплемент C4-A является неферментативным компонентом классического, лектинового и GZMK-путей активации комплемента, выступая в качестве предшественника, который протеолитически активируется для участия в защите врожденного иммунитета.
• После расщепления протеазами комплемента, такими как C1S, MASP2 или GZMK, он генерирует C4b, который ковалентно присоединяется к поверхностям патогенов, действуя как опсонин для маркировки антигенов к удалению. Связанные ссылки: PMID:8538770 PMID:27738201
• Затем C4b рекрутирует комплемент C2b для формирования C3- и C5-конвертаз, которые расщепляют и активируют C3 и C5, распространяя каскад комплемента. Связанные ссылки: PMID:12878586 PMID:18204047 PMID:2387864
• Фрагмент C4a, высвобождаемый во время активации, структурно схож с анафилатоксинами; однако его роль остается неясной, и более ранние сообщения о функции воспалительного медиатора могут быть связаны с загрязнением. Связанные ссылки: PMID:6167582 PMID:25659340
• Комплемент C4-A в основном секретируется гепатоцитами, с наибольшей экспрессией в печени; внепеченочный синтез в тканях, таких как надпочечники, щитовидная железа и почки, способствует локальной иммунной защите. Связанные ссылки: PMID:11367523
• На субклеточном уровне он обнаруживается секретированным во внеклеточное пространство, а также локализуется в синапсах, аксонах нейронов, дендритах и на поверхностях клеток.
• Белок подвергается нескольким посттрансляционным модификациям, включая образование дисульфидных связей, гликозилирование, фосфорилирование и сульфатирование, и содержит реактивную тиоэфирную связь, необходимую для ковалентного присоединения к целевым поверхностям.
• Он ассоциирован с вариантами заболеваний при системной красной волчанке и несет детерминанты антигенов групп крови; существует множество изоформ из-за альтернативного сплайсинга.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует C-концевому фрагменту (аа 940-1237), что может обеспечивать изоформ-специфичность; однако перекрестную реактивность с высокогомологичным C4B следует экспериментально подтверждать.
• Для вестерн-блоттинга используйте гели с низким процентным содержанием полиакриламида и увеличенное время переноса для эффективного разделения и переноса высокомолекулярной мишени (~193 кДа).
• При иммунофлуоресценции (IF-P), поскольку C4A секретируется и может откладываться на поверхностях клеток, оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации для обнаружения как внутриклеточного, так и связанного с поверхностью белка.
• Для ELISA это антитело можно использовать в качестве улавливающего или детектирующего реагента; для разработки сэндвич-ELISA используйте пару с другим клоном, нацеленным на неперекрывающийся эпитоп.
• Поскольку активация комплемента может расходовать C4, учитывайте условия обработки и хранения образцов для сохранения нативных уровней белка.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предлагает широкий выбор сырья для IVD, включая валидированные пары антител и рекомбинантные белки для изучения путей комплемента. Это моноклональное антитело к комплементу C4A является частью нашего портфолио, разработанного для поддержки разработки диагностических тестов от концепции до клиники. Свяжитесь с нами для оптовых заказов и индивидуального подбора антител.