Анти-CLOCK кроличий поликлональный антитело для WB, ELISA - O15516

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация CLOCK

• CLOCK (Circadian Locomotor Output Cycles Protein Kaput), также известный как bHLHe8, является основным компонентом молекулярных циркадных часов, которые управляют ритмами экспрессии генов, метаболизма и поведения с периодом около 24 часов (UniProt O15516).
• Являясь положительным звеном петли обратной связи транскрипция/трансляция, CLOCK образует гетеродимер с BMAL1 (или BMAL2) для связывания с элементами E-box (5'-CACGTG-3') в промоторах основных генов часов (PER1/2/3, CRY1/2) и генов, контролируемых часами, тем самым активируя транскрипцию.
• Гетеродимер CLOCK-BMAL1 предпочтительно распознает мотив 5'-CACGTGA-3', где CLOCK связывается с полу-сайтом 5'-CAC-3', а BMAL1 — с полу-сайтом 5'-GTGA-3'; также распознаются неканонические мотивы 5'-AACGTGA-3' и 5'-CATGTGA-3'. Связанные ссылки: PMID:23229515
• CLOCK обладает собственной гистонацетилтрансферазной активностью, что позволяет осуществлять циркадный ремоделинг хроматина путем ацетилирования гистонов (например, H3, H4) и негистоновых белков, включая сам BMAL1; эта активность так же важна для генерации ритмов, как и транскрипция.
• Он ацетилирует аргининосукцинатсинтазу 1 (ASS1) циркадным образом, что приводит к ингибированию ферментативной активности и ритмическому контролю биосинтеза аргинина и уреогенеза, связывая часы с метаболизмом. Связанные ссылки: PMID:28985504
• CLOCK подавляет транскрипционную активность рецептора глюкокортикоидов NR3C1/GR путем ацетилирования множественных остатков лизина в шарнирной области рецептора, снижая его связь с элементами ответа на глюкокортикоиды. Связанные ссылки: PMID:21980503
• Внутриклеточно CLOCK в основном находится в ядре, но также обнаруживается в цитоплазме и цитозоле. Он широко экспрессируется, с наивысшим уровнем в я семенниках и скелетных мышцах, и высоко обогащен в супрахиазматическом ядре (SCN) мозга — центральных часах.
• Посттрансляционные модификации, включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование, точно настраивают стабильность и активность CLOCK, способствуя точному осцилляторному контролю циркадных ритмов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 450-600 человеческого CLOCK, области, которая может обеспечить распознавание домена ацетилтрансферазы и помочь обнаружить как полную длину, так и потенциальные изоформы; рассмотрите возможность проверки реактивности в соответствующих видах и тканях.
• Для вестерн-блоттинга предсказанный молекулярный вес CLOCK составляет 95 кДа; однако посттрансляционные модификации (например, фосфорилирование, ацетилирование) могут сместить наблюдаемую полосу. Используйте соответствующие блокирующие буферы и буферы для детекции, оптимизированные для кроличьих поликлональных антител.
• Для ИФА убедитесь, что покрытие рекомбинантным белком или пептидом соответствует области иммуногена для максимизации захвата антител. Титруйте антитело для определения оптимальной рабочей концентрации в вашей аналитической системе.
• Перекрестная реактивность зарегистрирована для человека, мыши и крысы; провалидируйте в выбранной модельном организме с использованием положительных и отрицательных контролей. Экспрессия CLOCK носит циркадный характер, поэтому учитывайте время суток при заборе материала для исследования эндогенных уровней.

CamelBio: Ваш мост для снабжения полного цикла

CamelBio предлагает комплексный портфель реагентов для IVD, включая валидированные антитела и вспомогательные реагенты, для поддержки производителей диагностических средств и исследовательских лабораторий от концепции до клиники. Наше поликлональное антитело к CLOCK служит надежным инструментом для изучения циркадной биологии и регуляции транскрипции, а мы можем поставить большие объемы, пары подобранных антител или пользовательские формулировки по запросу. Независимо от того, нужны ли вам антитела к редким мишеням, оптимизированные компоненты для иммуноанализов или технические консультации, CamelBio — ваш надежный партнер для ускоренной разработки IVD.