Моноклональное антитело против расщепленного PARP (Asp214) для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ИФА - P09874

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция PARP1 и локализация

• PARP1 — это ядерная поли-АДФ-рибозилтрансфераза, опосредующая поли-АДФ-рибозилирование белков-субстратов и играющая центральную роль в репарации ДНК, ремоделировании хроматина и стабильности генома (PubMed:17177976, PubMed:18055453, PubMed:18172500). Связанные ссылки: PMID:17177976 PMID:18055453 PMID:18172500
• Он катализирует АДФ-рибозилирование по серину, глутамату и тирозину, при этом специфичность остатков определяется кофакторами HPF1 и NMNAT1 (PubMed:28190768, PubMed:32028527, PubMed:29954836). Связанные ссылки: PMID:28190768 PMID:32028527 PMID:29954836
• В процессе репарации ДНК PARP1 обнаруживает разрывы цепей, рекрутирует факторы репарации и способствует расслаблению хроматина для облегчения репарации эксцизией оснований и разрывов двойной цепи (PubMed:26344098, PubMed:30356214, PubMed:19344625). Связанные ссылки: PMID:26344098 PMID:30356214 PMID:19344625
• Во время апоптоза PARP1 расщепляется каспазами-3 и -7 в точке Asp214, образуя большой каталитический фрагмент (~89 кДа), который транслокирует в цитоплазму и служит переносчиком поли-АДФ-рибозы, запуская апоптоз, опосредованный AIFM1 (PubMed:33168626). Связанные ссылки: PMID:33168626
• Субклеточная локализация преимущественно ядерная и ядрышковая в нормальных условиях; после расщепления каталитический фрагмент перемещается в цитоплазму.
• PARP1 подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая ацетилирование, АДФ-рибозилирование (автомодификацию), фосфорилирование и убиквитинирование, которые регулируют его активность и взаимодействия.
• Помимо репарации ДНК, PARP1 функционирует в регуляции транскрипции, прогрессировании репликационной вилки, адипогенезе и врожденном иммунитете, модулируя активность белков и структуру хроматина (PubMed:15607977, PubMed:22464733, PubMed:35460603). Связанные ссылки: PMID:15607977 PMID:22464733 PMID:35460603

Экспериментальное руководство и технические советы

• Это антитело нацелено на неоэпитоп в точке Asp214; таким образом, оно специфически обнаруживает расщепленный фрагмент PARP, а не полноразмерный PARP. Для вестерн-блоттинга обрабатывайте клетки индукторами апоптоза (например, стауроспорином или этопозидом) для обогащения фрагмента ~89 кДа.
• Для иммунофлуоресценции/ICC рассмотрите возможность фиксации после индукции апоптоза для наблюдения цитозольной локализации расщепленного фрагмента. Проверьте специфичность окрашивания в вашей экспериментальной системе с помощью соответствующих контролей.
• Пригодность для ИФА подтверждена; при разработке анализов рассмотрите возможность использования рекомбинантного расщепленного фрагмента PARP или пептида в качестве стандарта и оптимизируйте условия покрытия и детекции.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предлагает интегрированный доступ к высококачественному сырью для IVD, поддерживая ваши исследования повреждения ДНК и апоптоза или разработку диагностических средств. Мы специализируемся на поставке валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных антител, реактивов оптом и поиске редких мишеней, оптимизируя ваш путь от идеи к клинике.