Антитело к расщепленной каспазе-8 (Asp384) кроличье моноклональное для Вестерн блоттинга, ИФА - Q14790

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация каспазы-8

• Каспаза-8 — это тиоловая протеаза, которая функционирует как молекулярный переключатель для апоптоза, некроптоза и пироптоза и необходима для предотвращения повреждения тканей во время развития и во взрослом возрасте. Связанные ссылки: PMID:23516580 PMID:35338844 PMID:35446120
• Как инициаторная каспаза, она опосредует внешний апоптоз, формируя комплекс, индуцирующий гибель (DISC), при активации FAS/CD95 или TNFRSF1A, что приводит к расщеплению и активации эффекторных каспаз CASP3, CASP6, CASP7 и других. Связанные ссылки: PMID:8681376 PMID:8681377 PMID:9184224 PMID:8962078 PMID:9006941 PMID:16916640
• Существует несколько изоформ: изоформа 1 (полноразмерная), изоформа 5 и изоформа 7 широко экспрессируются; изоформы, лишенные каталитического сайта, действуют как ингибиторы каспазного каскада. Связанные ссылки: PMID:12010809
• Белок локализуется в цитоплазме, ядре и клеточных выростах, таких как ламеллиподии, и подвергается фосфорилированию по Tyr-380 для стимуляции клеточной миграции независимо от протеазной активности. Связанные ссылки: PMID:18216014 PMID:27109099
• Каспаза-8 негативно регулирует некроптоз, расщепляя RIPK1 по Asp-324, ограничивая киназную активность и воспалительные реакции. Связанные ссылки: PMID:31827280 PMID:31827281
• Она также инициирует пироптоз, расщепляя газдермин-C и газдермин-D, и участвует во врожденном иммунитете, инактивируя N4BP1 ниже по сигнальному пути от TLR3/4. Связанные ссылки: PMID:32929201 PMID:34012073
• Наибольшая экспрессия наблюдается в лейкоцитах периферической крови, селезенке, тимусе и печени, с более низкими уровнями в головном мозге, яичках и скелетных мышцах.
• Ключевые слова включают: альтернативный сплайсинг, зимоген, тиоловая протеаза, вариант, связанный с заболеванием, взаимодействие хозяин-вирус.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 371–470 человеческой каспазы-8 (NP_203519.1), которые охватывают область большой субъединицы после аутопротеолиза по Asp384; таким образом, антитело специфично к расщепленной, активированной форме.
• Для Вестерн блоттинга профермент мигрирует примерно при 55 кДа, в то время как расщепленная большая субъединица обычно проявляется в районе 43–45 кДа. Рекомендуется включение соответствующих положительных и отрицательных контролей (например, клеток, обработанных индукторами апоптоза) для подтверждения идентичности полос.
• Оптимизация ИФА может потребовать титрования концентрации антитела и тщательного подбора блокирующих агентов для снижения фона; рассмотрите возможность использования рекомбинантного белка или пептида каспазы-8 в качестве стандарта.
• Перекрестная реактивность с другими видами не определялась; при планировании применения на нечеловеческих образцах проведите валидацию в соответствующей системе.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследовательские институты в комплексной закупке сырья для ИФА, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты оптом. Наше антитело к каспазе-8, нацеленное на расщепленную форму, идеально встраивается в разработку тестов на апоптоз и гибель клеток. Помимо этого продукта, мы предлагаем решения по поиску редких мишеней и технические консультации для оптимизации разработки ваших тест-систем от концепции до клинического применения.