Кроличье моноклональное антитело к расщеплённой каспазе-1 p20 для WB, ELISA — P29466

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация каспазы-1

• Каспаза-1 — тиоловая протеаза, относящаяся к семейству каспаз и кодируемая геном CASP1 (также известным как IL1BC, ICE). Она синтезируется в виде неактивного зимогена (p45), который протеолитически процессируется до активных субъединиц p20 и p10.
• Играет центральную роль в воспалительных реакциях, расщепляя предшественники интерлейкина-1 бета (pro-IL1B) и интерлейкина-18 (pro-IL18) до их биологически активных зрелых цитокинов после сборки комплексов инфламмасом. Связанные публикации: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• Кроме того, каспаза-1 инициирует пироптоз — литическую форму программируемой клеточной смерти — расщепляя Gasdermin-D (GSDMD) и образуя N-концевой фрагмент, который формирует поры в мембране. Связанные публикации: PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Во время бактериальной инфекции каспаза-1 расщепляет и активирует каспазу-7 (CASP7), способствуя восстановлению плазматической мембраны. Связанные публикации: PMID:22464733
• В противовирусном иммунитете каспаза-1 контролирует ответы, индуцированные ДНК-вирусами, расщепляя и инактивируя циклическую GMP-AMP-синтазу (CGAS). Связанные публикации: PMID:28314590
• Субклеточная локализация включает цитоплазму и клеточную мембрану, что соответствует её роли в процессинге цитокинов и осуществлении пироптоза.
• Экспрессия в тканях имеет широкий характер: более высокие уровни отмечаются в селезёнке и лёгких, а обнаруживаемые количества — в печени, сердце, тонком кишечнике, толстой кишке, тимусе, предстательной железе, скелетной мышце, лейкоцитах периферической крови, почках и яичках; в головном мозге экспрессия отсутствует.
• Белок подвергается альтернативному сплайсингу и образованию изопептидных связей, а его активация включает межмолекулярный автопротеолитический процессинг; он относится к семейству пептидаз C14A.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Иммуногеном для данного моноклонального антитела является синтетический пептид, соответствующий аминокислотам 200–300 в составе субъединицы p20 человеческой каспазы-1. Предполагается, что этот участок доступен в расщеплённой активной форме фермента.
• Для анализа методом вестерн-блоттинга (WB) готовьте лизаты клеток или тканей в восстановительных условиях. Для выявления расщеплённого фрагмента p20 рекомендуется использовать известные индукторы активации каспазы-1 (например, активаторы инфламмасомы NLRP3, такие как нигерицин или АТФ). Ожидается полоса размером приблизительно 20 кДа, наряду с возможными полноразмерными или промежуточными про-формами.
• Для применения в ELISA антитело может использоваться для захвата или обнаружения расщеплённой каспазы-1 p20 в сыворотке, плазме человека или супернатантах клеточных культур; оптимальные разведение и сочетание с парным антителом следует определять экспериментально.
• Перекрёстная реактивность с другими видами не сообщалась; при работе с образцами видов, отличных от человеческого, необходимо валидировать антитело в соответствующих системах образцов.
• С учётом указанных молекулярных масс белка (10/29/35/42/45 кДа) они, вероятно, соответствуют различным промежуточным продуктам расщепления и изоформам; идентичность обнаруженных полос следует подтверждать с использованием соответствующих контролей (например, необработанных и активированных образцов).

CamelBio: ваш универсальный партнёр по поиску материалов

CamelBio — ваш универсальный партнёр по поиску сырья для IVD, предлагающий валидированные моноклональные антитела, такие как это антитело к расщеплённой каспазе-1 p20, для продвижения исследований в области воспаления, иммунологии и программируемой клеточной смерти. Помимо антител, мы поставляем полный спектр вспомогательных реагентов, антигенных белков и предлагаем индивидуальное крупносерийное производство, чтобы ускорить разработку диагностических решений от концепции до коммерциализации. Наш опыт в поиске редких мишеней гарантирует стабильное качество материалов для всех ваших аналитических задач.