Поликлональные антитела против CHRNA1 для WB, IF, IHC, ELISA - P02708

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация CHRNA1

• CHRNA1 кодирует альфа-субъединицу никотинового ацетилхолинового рецептора (AChR), лиганд-зависимого ионного канала, который опосредует быструю синаптическую передачу в нервно-мышечном соединении. При связывании ацетилхолина рецептор претерпевает конформационные изменения, приводящие к открытию канала и притоку катионов.
• Белок также известен под несколькими псевдонимами: ACHRA, ACHRD, CHRNA, CMS1A, CMS1B, CMS2A, FCCMS, SCCMS. Существуют две изоформы вследствие альтернативного сплайсинга: изоформа 1 специфична для скелетных мышц, а изоформа 2 широко экспрессируется в мозге, сердце, почках, печени, легких и вилочковой железе.
• CHRNA1 является членом семейства лиганд-зависимых ионных каналов, характеризующимся большим N-концевым внеклеточным доменом, четырьмя трансмембранными спиралями и цитоплазматической петлей. Он содержит дисульфидные связи и сайты гликозилирования, критически важные для сборки и функции рецептора.
• Внутриклеточно AChR расположен на постсинаптической клеточной мембране, где он кластеризуется в нервно-мышечном соединении. Правильная локализация требует взаимодействия с рапсином и другими скаффолдинговыми белками.
• Мутации в CHRNA1 связаны с врожденными миастеническими синдромами (CMS), включая CMS1A, CMS1B и CMS2A, а также с медленно-канальным врожденным миастеническим синдромом (SCCMS). Эти мутации изменяют кинетику канала, экспрессию рецептора или сродство к агонисту.
• Иммуноген, использованный для получения этого антитела, соответствует аминокислотам 105-220 белка CHRNA1 человека, который находится внутри внеклеточного домена. Этот регион, вероятно, распознает обе изоформы и консервативен у человека и мыши, что обеспечивает перекрестную реактивность.
• Посттрансляционные модификации включают N-связанную гликозилизацию и образование дисульфидных связей, которые важны для сворачивания и стабильности. Белок имеет расчетный молекулярный вес ~52 кДа, что соответствует наблюдаемой полосе при вестерн-блоттинге.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Эти поликлональные антитела получены от кролика против рекомбинантного фрагмента (а.к. 105-220). Для вестерн-блоттинга ожидается полоса около 52 кДа в лизатах скелетных мышц человека и мыши; рассмотрите использование восстанавливающих условий и подходящего блокирующего буфера для минимизации неспецифического связывания.
• Для иммунопреципитации распознавание антителом внеклеточного эпитопа может быть преимуществом; однако рекомендуется валидация в соответствующей системе клеток/тканей.
• В иммунофлуоресценции и иммуногистохимии оптимальные методы фиксации и пермеабилизации следует определить эмпирическим путем, так как эпитоп находится во внеклеточном домене, который может быть чувствителен к чрезмерной фиксации. Используйте соответствующие контроли, такие как нокаутные клеточные линии или блокирующие пептиды.
• Для ELISA антитело можно использовать для захвата или детекции; титруйте для определения оптимальной рабочей концентрации.

CamelBio: Ваш комплексный мост для закупок

CamelBio выступает в качестве комплексного моста для закупок сырья для IVD, предлагая валидированные пары антител, вспомогательные реактивы в больших объемах и редкие антитела к целям, такие как это поликлональное антитело против CHRNA1. Разрабатываете ли вы диагностические тесты для нервно-мышечных расстройств или исследуете биологию ионных каналов, CamelBio обеспечивает комплексный доступ к высококачественным антителам и технической поддержке для оптимизации вашего процесса разработки.