Поликлональные антитела против Chk1 для Вестерн-блоттинга и ИФА - O14757

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация Chk1

• Chk1 (Checkpoint kinase 1) — это серин/треониновая протеинкиназа и член суперсемейства протеинкиназ, обладающая консервативным киназным доменом и сайтом связывания АТФ.
• Он необходим для остановки клеточного цикла, опосредованной контрольными точками, и активации репарации ДНК в ответ на повреждение ДНК или нереплицированную ДНК, распознавая консенсусную последовательность субстрата [R-X-X-S/T]. Связанные ссылки: PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Chk1 фосфорилирует фосфатазы CDC25 (CDC25A, CDC25B, CDC25C), создавая сайты связывания 14-3-3 и способствуя протеолизу CDC25A, тем самым ингибируя комплексы CDK-циклин и блокируя прогрессию клеточного цикла. Связанные ссылки: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511 PMID:19734889 PMID:20090422
• Фосфорилирование TP53 в множественных C-концевых сайтах с помощью Chk1 способствует его ацетилированию и активации, что приводит к остановке клеточного цикла и подавлению пролиферации. Связанные ссылки: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Chk1 играет прямую роль в репарации ДНК, фосфорилируя RAD51 в положении Thr-309 (усиливая гомологичную рекомбинацию), FANCE (облегчая репарацию перекрестных сшивок ДНК) и регулируя поддержание вилки репликации через PCNA. Связанные ссылки: PMID:15665856 PMID:17296736 PMID:18451105
• Chk1 модулирует хроматин посредством фосфорилирования TLK1 в положении Ser-743, предотвращая фосфорилирование ASF1A и потенциально усиливая сборку хроматина, а также путем фосфорилирования гистона H3.1 в положении Thr11 для регуляции транскрипции генов. Связанные ссылки: PMID:12660173 PMID:12955071
• Альтернативно сплайсированный изоформ белка CHEK1 действует как эндогенный репрессор полноразмерного Chk1, способствуя переходу от S-фазы к G2/M фазе за счет прямого взаимодействия и антагонизма.
• Chk1 локализуется в ядре, хромосомах, цитоплазме и центросомах. Он экспрессируется повсеместно с наивысшим уровнем в вилочковой железе, яичках, тонком кишечнике и толстой кишке.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга используйте восстанавливающие условия и готовьте лизаты из клеток или тканей, известных экспрессией Chk1, таких как вилочковая железа или яички. Прогнозируемый молекулярный вес составляет ~54 кДа; однако посттрансляционные модификации могут вызывать видимые сдвиги.
• Иммуноген соответствует аминокислотам 148-307 Chk1 человека, что находится в пределах киназного домена. Хотя этот регион высококонсервативен в каноническом изоформе, рекомендуется валидация с соответствующими контролами для оценки реактивности с потенциальными альтернативными изоформами.
• Эти кроличьи поликлональные антитела валидированы для ИФА и WB. Для применения в ИФА рассмотрите возможность использования рекомбинантного белка Chk1 или фрагмента в качестве стандарта, а также оптимизируйте разведение антител и условия блокировки для вашего формата анализа.
• Поскольку это поликлональные антитела, возможна вариабельность между партиями. Мы рекомендуем валидировать эффективность в вашей экспериментальной системе и использовать соответствующие положительные и отрицательные контроли.

CamelBio: Ваш комплексный мост поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и лабораториям комплексный набор реагентов для IVD (in vitro diagnostics), включая валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные антитела, подобные этим антителам против Chk1, вспомогательные реагенты оптом и поиск редких мишеней. Обладая экспертизой, охватывающей весь процесс разработки диагностических средств — от концепции до клиники, — CamelBio поддерживает ваши исследовательские проекты в области контрольных точек клеточного цикла и реакции на повреждение ДНК надежными поставками сырья и техническими консультациями. Свяжитесь с нами, чтобы узнать, как наша комплексная платформа поставок может оптимизировать разработку ваших анализов.