Кроличье моноклональное антитело против cGAS для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - Q8N884

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация cGAS

• cGAS (циклическая GMP-AMP синтаза), также известная как MB21D1 или C6orf150, кодируется геном CGAS. Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ.
• Выполняет функцию нуклеотидилтрансферазы, катализирующей синтез циклического динуклеотида 2'3'-cGAMP из АТФ и ГТФ. Связанные ссылки: PMID:21478870, PMID:23258413, PMID:23707061, PMID:28214358, PMID:28363908
• cGAS является ключевым цитозольным сенсором ДНК, который напрямую связывает двуцепочечную ДНК (дцДНК) достаточной длины и кривизны, что приводит к конденсации в жидкой фазе и активации фермента. Связанные ссылки: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794, PMID:30007416
• После активации продуцируемый cGAS 2'3'-cGAMP связывается с адаптерным белком STING1, запуская сигнальный каскад, который индуцирует интерфероны I типа и другие иммунные медиаторы. Связанные ссылки: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794
• cGAS обнаруживает дцДНК широкого спектра патогенов, включая ДНК-вирусы, ретровирусы (например, ВИЧ-2) и бактерии (например, M. tuberculosis), что делает его универсальным сенсором врожденного иммунитета. Связанные ссылки: PMID:28363908, PMID:35613581, PMID:23929945, PMID:24269171, PMID:30270045, PMID:26048138
• При клеточном стрессе (повреждение митохондрий, старение, повреждение ДНК) собственная ДНК попадает в цитоплазму или накапливается в виде микроядер, что приводит к аномальной активации cGAS и развитию стерильного воспаления. Связанные ссылки: PMID:28738408, PMID:28759889, PMID:31299200
• cGAS преимущественно локализуется в цитоплазме, но также обнаруживается в ядре, где ее связывание с нуклеосомами хроматина ингибирует активность для предотвращения аутоиммунной активации. Связанные ссылки: PMID:31299200, PMID:32911482, PMID:32912999
• Помимо иммунитета, cGAS модулирует репарацию повреждений ДНК, взаимодействуя с PARP1 для подавления гомологичной рекомбинации, а также чувствует трансляционный стресс, ассоциируясь со сталкивающимися рибосомами. Связанные ссылки: PMID:30356214, PMID:31544964, PMID:34111399
• Экспрессия в тканях зарегистрирована в моноцитарной клеточной линии THP1; посттрансляционные модификации (ацетилирование, фосфорилирование, убиквитинирование, пальмитоилирование) динамически регулируют локализацию и активность cGAS.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует пептиду в пределах С-концевой области (аа 430–522) человеческого cGAS. Рекомендуется проверить распознавание всех сплайс-вариантов, если релевантны несколько изоформ.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса приблизительно 59 кДа; используйте соответствующие позитивные контроли (например, лизат клеток THP1). Проверяйте специфичность антитела с использованием образцов с нокаутом или нокдауном cGAS.
• Для иммуногистохимии (ИГХ-П) и иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) могут потребоваться оптимизированные условия демаскировки антигена и пермеабилизации. Включайте соответствующие контроли для подтверждения ядерной/цитоплазматической локализации.
• В применениях для ИФА убедитесь, что буфер для иммобилизации и условия детекции совместимы с форматом кроличьего моноклонального антитела.
• Перекрестная реактивность тестировалась только на человеческих образцах; реактивность с другими видами не охарактеризована и должна быть определена экспериментально.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям упрощенный доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, от валидированных антител до рекомбинантных белков и вспомогательных реагентов. Это анти-cGAS кроличье моноклональное антитело является частью нашего портфолио для изучения врожденного иммунитета, поддерживая исследования в области сенсинга ДНК, аутовоспаления и противовирусных ответов. Наша модель комплексных поставок обеспечивает надежное снабжение в больших объемах, позволяя вам ускорить разработку анализов и клинический перевод.