Кроличье поликлональное антитело против CD73/NT5E для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - P21589

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация CD73/NT5E

• CD73/NT5E кодирует экто-5'-нуклеотидазу, мембранный белок, заякоренный через гликозилфосфатидилинозитол (GPI), который катализирует гидролиз внеклеточных нуклеотидмонофосфатов до соответствующих нуклеозидов и неорганического фосфата.
• Катализирует гидролиз АМФ до аденозина и неорганического фосфата, с предпочтением рибонуклеотидмонофосфатов перед дезоксирибозными формами (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347, PubMed:34403084). Связанные ссылки:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• PMID:34403084
• Обладает широкой субстратной специфичностью, включая ИМФ, УМФ, ГМФ, ЦМФ, дАМФ, дЦМФ, дТМФ, НАД и НМН (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347). Связанные ссылки:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• Локализован на клеточной мембране через C-концевой GPI-якорь, располагая активный сайт внеклеточно для регуляции пуринергической сигнализации и иммунных ответов.
• Требует цинк в качестве кофактора для каталитической активности; фермент содержит биядерный цинковый центр, необходимый для гидролиза фосфата.
• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование и образование дисульфидных связей, что способствует стабильности и функции белка.
• Генетические варианты в NT5E ассоциированы с артериальной кальцификацией из-за дефицита CD73 (ACDC), редким аутосомно-рецессивным заболеванием.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует остаткам 27–377 человеческого NT5E, которые охватывают большую часть внеклеточного домена; такой дизайн способствует детекции CD73 на поверхности клетки в его нативной конформации.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рассмотрите диапазон разведений 1:500–1:2000 и учитывайте, что предсказанная молекулярная масса составляет ~63 кДа; в восстановительных условиях гликозилированные формы могут проявляться несколько выше.
• Для иммуногистохимии (ИГХ-П) и иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) часто полезна антигенная демаскировка цитратным буфером (pH 6.0); проводите валидацию на панели позитивных и негативных контрольных тканей.
• Перекрестная реактивность с мышиным и крысиным белком продемонстрирована, но учитывая видоспецифичные вариации последовательностей, оптимальные рабочие разведения следует определять эмпирически для каждого анализа.
• Как поликлональное антитело, оно может варьироваться от партии к партии; мы рекомендуем титровать каждую новую партию и включать соответствующие позитивные и негативные контроли в каждый эксперимент.
• Для ИФА можно тестировать прямой иммобилизацию (коатинг) рекомбинантного белка или форматы "захват-детекция"; проводите титрование в шахматном порядке для оптимизации соотношения сигнал/шум.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio поддерживает производителей IVD и исследовательские лаборатории, предоставляя комплексную цепочку поставок высококачественных исходных материалов, включая валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты. Поликлональное антитело против CD73/NT5E встраивается в рабочие процессы, исследующие пуринергическую сигнализацию, метаболизм аденозина и иммунную регуляцию. Если вам требуются большие объемы, индивидуальные конъюгации или вы испытываете трудности с поиском реагентов для редких мишеней, свяжитесь с CamelBio, чтобы обсудить, как мы можем оптимизировать ваши закупки — от концепции до клиники.