Кроличья полимональная антитела PolymAb® против CD68 для WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – P34810 / P31996

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация CD68

• Макросиалин (CD68) – высокогликозилированный трансмембранный гликопротеин, принадлежащий к семейству лизосомально-ассоциированных мембранных белков (LAMP), также известный как Lamp4, gp110 и Scard1. Расчетная молекулярная масса ядерного белка составляет ~37 кДа, но обширная N- и O-связанная гликозилирование приводит к видимому размеру 70–130 кДа в SDS-PAGE.
• CD68 преимущественно экспрессируется на эндосомальных и лизосомальных мембранах моноцитов и тканевых макрофагов, где участвует в фагоцитозе и внутриклеточном лизосомальном метаболизме.
• За счет связывания тканеспецифических и органоспецифических лектинов или селектинов CD68 облегчает миграцию макрофагов в очаги воспаления или повреждения и может обеспечивать передвижение клеток по субстратам, покрытым селектинами, за счет быстрой рециклизации между эндолизосомальными компартментами и плазматической мембраной.
• Помимо макрофагов, CD68 экспрессируется в более низких концентрациях в лимфоцитах, фибробластах, эндотелиальных клетках и многих опухолевых клеточных линиях, что потенциально способствует прикреплению опухолевых клеток к сосудистому эндотелию и метастатическому распространению.
• Посттрансляционные модификации включают образование дисульфидных связей, интенсивную гликозилирование и отщепляемый сигнальный пептид, что способствует созреванию белка и его мембранному траффику.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ CD68, а его функциональный репертуар дополнительно расширяется за счет взаимодействия с компонентами внеклеточного матрикса и рецепторами клеточной адгезии.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой рекомбинантный белок, охватывающий последовательность CD68 как человека, так и мыши, что указывает на широкую перекрестную реактивность; тем не менее исследователям следует валидировать реактивность в конкретных экспериментальных системах.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) ожидается появление широкой полосы в диапазоне 70–130 кДа из-за вариабельной гликозилирования; рекомендуется включать положительный контроль в виде лизата макрофагов и использовать гели SDS-PAGE с концентрацией акриламида 8–12% для оптимального разделения.
• В IHC-P и IF/ICC эффективное детектирование может потребовать шагов извлечения антигена (термического или ферментативного) и пермеабилизации для доступа к внутриклеточной эндосомальной/лизосомальной локализации антигена.
• Для ELISA необходим подбор совместимого детектирующего антитела; компания CamelBio предлагает валидированные пары антител для ускоренной разработки анализов.
• Поскольку CD68 является общепризнанным маркером макрофагов, двойное окрашивание с другими маркерами линейного происхождения (например, CD163, CD11b) помогает идентифицировать субпопуляции макрофагов на тканевых срезах.

CamelBio: ваш универсальный поставщик сырья для разработок

CamelBio специализируется на предоставлении производителям диагностикумов, лабораториям и научно-исследовательским институтам универсального доступа к сырью для ИВД, включая валидированные моноклональные и поликлональные антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реактивы в больших объемах. Для изучения биологии макрофагов и иммунологического профилирования наш портфель оптимизированных антител и пар антител к CD68 поддерживает надежную разработку наборов для иммуногистохимии, иммунофлуоресценции и ELISA. Независимо от того, нуждаетесь ли вы в закупке больших объемов реактивов, подборе реагентов по индивидуальному заказу или консультации по работоспособности анализа, CamelBio обеспечивает поддержку всего вашего рабочего процесса от идеи до клинического применения.