Поликлональное кроличье антитело Anti-CD68 для WB, IF/ICC, ELISA — P34810

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация CD68

• CD68, также известный как макросиалин, GP110, LAMP4 или SCARD1, представляет собой сильно гликозилированный трансмембранный гликопротеин, относящийся к семейству LAMP.
• Он преимущественно экспрессируется на мембранах эндосом и лизосом, однако также может быстро рециркулировать на поверхность клетки, что указывает на его роль в адгезии и клеточной подвижности.
• CD68 участвует в фагоцитарной активности макрофагов, задействованной как во внутриклеточном лизосомальном метаболизме, так и во внеклеточных взаимодействиях клетка–клетка и клетка–патоген.
• Связываясь с ткане- и органоспецифичными лектинами или селектинами, CD68 способствует направленной миграции подмножеств макрофагов в определённые анатомические области.
• Белок содержит муциноподобный домен, который, вероятно, участвует в связывании лигандов и может опосредовать прикрепление к селектинам на эндотелиальных клетках, способствуя распространению макрофагов и опухолевых клеток.
• CD68 высоко экспрессируется в моноцитах крови и тканевых макрофагах, а также обнаруживается в лимфоцитах, фибробластах, эндотелиальных клетках и различных линиях опухолевых клеток.
• Множественные посттрансляционные модификации, включая N-связанное гликозилирование и дисульфидные связи, способствуют структурной стабильности белка и увеличению его молекулярной массы примерно до 110 кДа (зрелая гликозилированная форма), хотя расчётная масса основного белка составляет около 37 кДа.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, которые могут иметь различные функции или характер экспрессии.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (рекомбинантный белок, соответствующий аминокислотам 16–200) нацелен на внеклеточную область N-концевого участка; антитело может распознавать как основной белок, так и зрелую гликозилированную форму.
• Для вестерн-блоттинга (WB) рекомендуется тестировать как восстановительные, так и невосстановительные условия. Следует учитывать, что наблюдаемая полоса может мигрировать в диапазоне от 37 кДа (основной белок) до 110 кДа (гликозилированная форма) в зависимости от образца и экспериментальных условий.
• Для иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) ожидается характер окрашивания, соответствующий эндосомам, лизосомам и клеточной мембране; протоколы фиксации и пермеабилизации следует оптимизировать с учётом типа клеток.
• Для применения в ELISA могут потребоваться соответствующие условия сорбции и блокирования; для сэндвич-анализов рекомендуется использовать подходящее детектирующее антитело в паре.
• Валидируйте антитело на соответствующем виде (человек, мышь, крыса) и подходящих положительных контрольных образцах, таких как клеточные линии макрофагов (например, THP-1, RAW 264.7) или мононуклеарные клетки периферической крови.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по поставкам

CamelBio — специализированный партнёр для производителей диагностических систем и исследовательских учреждений, предлагающий широкий ассортимент сырья для IVD и техническую поддержку на всех этапах — от разработки концепции до клинического применения. Для исследований биологии макрофагов, миграции иммунных клеток или микроокружения опухоли мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, а также вспомогательные реагенты для оптовых закупок. Наши возможности по поиску поставщиков также распространяются на редкие мишени и индивидуально разработанные рекомбинантные белки, обеспечивая бесперебойную цепочку поставок для ваших проектов, связанных с CD68.