Кроличье моноклональное антитело Anti-CD68 для Вестерн-блоттинга (WB), ИФ (IF-P), проточной цитометрии (FC, внутриклеточно) и ИФА - P34810

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация CD68

• CD68, также известный как макросиалин, GP110, LAMP4 и SCARD1, представляет собой сильно гликозилированный трансмембранный белок типа I, принадлежащий к семейству лизосомальных мембранных белков (LAMP).
• Он преимущественно локализуется в мембранах эндосом и лизосом, но может рециркулировать на поверхность клетки, обеспечивая быстрое представление на плазматической мембране макрофагов.
• Белок играет критическую роль в фагоцитозе, опосредуя внутриклеточный лизосомальный метаболизм поглощенного материала и участвуя во внеклеточных взаимодействиях с патогенами и другими клетками.
• CD68 связывается с лектинами или селектинами, специфичными для тканей и органов, что способствует гомингу субпопуляций макрофагов в конкретные анатомические участки и поддерживает адгезию и миграцию макрофагов.
• Предполагается, что быстрая рециркуляция CD68 из эндосом и лизосом к плазматической мембране помогает макрофагам перемещаться по субстратам или клеткам, несущим селектины.
• Хотя CD68 сильно экспрессируется в моноцитах крови и тканевых макрофагах, он также обнаруживается в лимфоцитах, фибробластах, эндотелиальных клетках и многих линиях опухолевых клеток, где может способствовать диссеминации опухолевых клеток за счет связывания с сосудистыми селектинами.
• Белок характеризуется наличием множества N-концевых муциноподобных доменов, одной трансмембранной спирали и короткого цитоплазматического хвоста, а также обширным N- и O-гликозилированием и несколькими внутримолекулярными дисульфидными связями.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, охватывающий остатки 100–200 человеческого CD68 (NP_001242.2). Консервативность последовательности в этом регионе, вероятно, лежит в основе перекрестной реактивности с мышью и крысой.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) предсказанная молекулярная масса негликозилированного остова составляет ~37 кДа, но сильно гликозилированные формы часто мигрируют с более высокой кажущейся молекулярной массой (80–110 кДа). Рекомендуется использование соответствующего блокирования и маркеров молекулярного веса.
• При иммунофлуоресценции (IF-P) и внутриклеточной проточной цитометрии (FC) пермеабилизация необходима, поскольку CD68 в основном находится в компартментах эндосом и лизосом; окрашивание поверхности требует учета динамики рециркуляции.
• Эффективность в ИФА (ELISA) зависит от доступности эпитопа; следует оптимизировать матричные эффекты и условия покрытия, так как сильная гликозилизация может маскировать или изменять связывание антитела.
• Учитывая широкую экспрессию в lineage моноцитов/макрофагов, включите соответствующие положительные контроли (например, клетки THP-1 или RAW 264.7) и изотипные контроли для подтверждения специфичности в требуемой образцовой системе.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio — ваш комплексный партнер по закупке сырья для IVD, соединяющий исследования и клинические применения. Для исследований макрофагов, воспаления и биологии опухолей, связанных с CD68, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Позвольте CamelBio оптимизировать ваши закупки сырья с надежной комплексной поддержкой, адаптированной к потребностям вашей диагностической разработки.