Поликлональные антитела к Anti-CD59 для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - P13987

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация CD59

• Гликопротеин CD59 (также известный как протектин, HRF20, MACIF, MIRL, MAC-IP) является ингибитором мембраноатакующего комплекса (MAC) комплемента на поверхности клетки.
• Он эффективно ингибирует сборку MAC, связываясь с компонентами C8 (C8A и C8B) и предотвращая внедрение C9 в формирующуюся пору, тем самым защищая клетки человека от комплемент-зависимого лизиса. Связанные ссылки: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Растворимая форма CD59, обнаруженная в моче, сохраняет способность связывать комплемент, но обладает значительно сниженной ингибиторной активностью в отношении MAC на клеточных мембранах.
• CD59 прикреплен к плазматической мембране посредством гликозилфосфатидилинозитола (GPI) связи, а также обнаруживается в виде секретируемого белка.
• Белок подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая N-связанное гликозилирование, образование дисульфидных связей и гликирование, что способствует его структурной стабильности и функции.
• Генетический дефицит CD59 связан с наследственной гемолитической анемией, что подчеркивает его критическую роль в защите эритроцитов от атаки комплемента.
• Ген CD59 подвергается альтернативному сплайсингу, что приводит к образованию нескольких вариантов транскриптов, которые могут вносить вклад в функциональное разнообразие.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует зрелому внеклеточному домену CD59 (а.к. 26–128), что позволяет предположить, что антитело в основном распознает нативную, GPI-якорную форму на поверхности клеток и растворимые формы, лишенные GPI-якоря.
• Для Вестерн-блоттинга лизатов клеток или тканей человека ожидается полоса примерно при 14 кДа; однако N-гликозилирование может привести к расширению полосы или немного более высокой кажущейся молекулярной массе. Рекомендуется использовать восстанавливающие условия и проводить валидацию с соответствующими контролем.
• В применениях ИФА (ELISA) эти поликлональные антитела могут использоваться как для захвата антигена, так и для детекции CD59 в сыворотке крови, плазме или препаратах рекомбинантного белка. Рекомендуются эксперименты по титрованию (например, покрытие 1–5 мкг/мл) для оптимизации соотношения сигнал/шум.
• Поскольку это поликлональный реагент, экспериментально подтвердите перекрестную реактивность видов при изучении моделей, отличных от человеческой, и включите соответствующие отрицательные контроли для учета возможного неспецифического связывания.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории обширным портфелем реагентов для IVD, включая валидированные поликлональные и моноклональные антитела, пары антигенов и вспомогательные реагенты. Для мишеней системы комплемента, таких как CD59, мы предлагаем решения по поиску редких антител для оптимизации разработки ваших анализов от концепции до клиники. Свяжитесь с нами, чтобы обсудить оптовые закупки, технические консультации или индивидуальное управление цепочкой поставок для ваших диагностических наборов на основе CD59.