Моноклональное кроличье антитело против CD45 для FC и ИФА — P08575

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация CD45

• CD45, также известный как общий лейкоцитарный антиген (L-CA) или T200, представляет собой тирозин-протеиновую фосфатазу рецепторного типа (PTPRC), играющую ключевую роль в передаче сигналов в иммунных клетках.
• Он действует как положительный регулятор коактивации T-клеток при связывании с DPP4. Первый домен PTPase обладает ферментативной активностью, тогда как второй, по-видимому, влияет на специфичность субстратов первого. При активации T-клеток он рекрутирует и дефосфорилирует SKAP1 и FYN. Дефосфорилирует LYN и тем самым регулирует активность LYN. Связанные источники: PMID:35767951
• CD45 взаимодействует с CLEC10A на границе между антигенпрезентирующей клеткой и T-клеткой, способствуя регуляции порогов активации T-клеток и предотвращая аутоактивность.
• Альтернативно сплайсированные изоформы (от изоформы 1 до 8) дифференциально экспрессируются в тимоцитах: выявляются изоформы 1, 2, 3, 5 и 7, тогда как другие не обнаруживаются. Различия в молекулярной массе белка (131–147 кДа) отражают разнообразие этих изоформ.
• На субклеточном уровне CD45 локализуется в клеточной мембране, мембранных рафтах и иммунологическом синапсе, что соответствует его роли в проксимальной передаче сигналов от T-клеточного рецептора.
• В качестве фактора хозяина CD45 служит рецептором для белка UL11 человеческого цитомегаловируса, обеспечивая связывание вируса с T-клетками и последующее нарушение пролиферации и передачи сигналов в T-клетках.
• Посттрансляционные модификации включают интенсивное гликозилирование и фосфорилирование; белок содержит сигнальный пептид, трансмембранную спираль и тандемные фосфатазные домены.
• CD45 широко экспрессируется на всех ядросодержащих гемопоэтических клетках и необходим для развития и активации лимфоцитов, что делает его важным диагностическим маркером для идентификации лейкоцитов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Используемый иммуноген (аминокислоты 26–577) охватывает внеклеточную область человеческого CD45, включая несколько доменов, специфичных для изоформ; такая широкая область предполагает, что антитело может распознавать различные изоформы CD45 в нативных конформациях.
• Для проточной цитометрии (FC) рекомендуется титровать антитело на соответствующих субпопуляциях человеческих лейкоцитов (например, на PBMC и клетках Jurkat), чтобы определить оптимальные концентрации для окрашивания; используйте изотипические контроли для оценки неспецифического связывания.
• Для применения в ИФА оцените прямой или сэндвич-формат с использованием рекомбинантного белка CD45 или клеточных лизатов; подтвердите линейность и чувствительность с помощью стандартных калибровочных кривых.
• Поскольку CD45 интенсивно гликозилирован, убедитесь, что связывание антитела не нарушается гликозилированием в определённых типах образцов; денатурирующие условия могут влиять на доступность эпитопа.
• Антитело поставляется охлаждённым на льду; разделите его на аликвоты и храните при рекомендованной температуре (например, −20 °C), чтобы сохранить стабильность и избежать повторных циклов замораживания и оттаивания.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по поиску поставщиков

Как ведущий поставщик сырья для диагностики in vitro, CamelBio предлагает высококачественные моноклональные антитела, такие как данный клон против CD45, а также валидированные пары антител, вспомогательные реагенты в больших объёмах и услуги индивидуального поиска редких белков-мишеней. Независимо от того, разрабатываете ли вы диагностические методы на основе проточной цитометрии или иммунные ИФА-тесты для заболеваний, опосредованных иммунными реакциями, наша интегрированная цепочка поставок помогает перейти от концепции к коммерциализации. Сотрудничайте с CamelBio для надёжного доступа к важнейшим иммунологическим реагентам и технической экспертизе.