Моноклональное антитело против CD45 для WB, IHC-P, mIHC, ELISA — P08575

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация CD45

• CD45, официально обозначаемый как рецепторная тирозинпротеинфосфатаза C (PTPRC), также известен как общий лейкоцитарный антиген (L-CA), T200 и B220 (в контексте специфичности изоформы). Это ключевой трансмембранный гликопротеин, экспрессируемый на всех ядерных гемопоэтических клетках.
• Данная фосфатаза необходима для активации Т-клеток и выступает в роли положительного регулера коактивации Т-клеток при связывании с DPP4. Его первый фосфатазный домен обладает ферментативной активностью, тогда как второй модулирует субстратную специфичность. При активации Т-клеток CD45 рекрутирует и дефосфорилирует сигнальные молекулы, такие как SKAP1, FYN и LYN. Связанные источники: PMID:35767951
• При микробных инфекциях CD45 функционирует как рецептор для белка цитомегаловируса человека UL11, опосредуя связывание UL11 с Т-клетками. Это взаимодействие приводит к снижению тирозинфосфорилирования сигнальных белков при стимуляции TCR и нарушению пролиферации Т-клеток.
• Субклеточно CD45 локализуется на клеточной мембране с обогащением в мембранных рафтах и иммунологическом синапсе, что подчеркивает его роль в проксимальных сигнальных процессах.
• Ген PTPRC подвергается обширному альтернативному сплайсингу, в результате которого образуется несколько изоформ (например, изоформы 1–8), демонстрирующих различную тканеспецифичную экспрессию, особенно в тимоцитах.
• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование и фосфорилирование, мутации в PTPRC связаны с тяжелым комбинированным иммунодефицитом (ТКИД).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блота учтите большую молекулярную массу (~147 кДа): используйте гель SDS-PAGE с соответствующей низкой концентрацией акриламида и увеличенное время переноса. Добавляйте положительный контрольный лизат клеточной линии лейкоцитов человека (например, Jurkat) для подтверждения специфичности полосы.
• В IHC-P и mIHC проводите оптимизацию извлечения антигена (например, термоиндуцированная элитопная ретриевка) и титруйте концентрацию антитела, так как реактивность специфична для человека. Используйте контрастное окрашивание ядерным красителем для визуализации морфологии клеток.
• Для ELISA это моноклональное антитело может использоваться в качестве детектирующего реагента; при разработке сэндвич-анализа рассмотрите возможность комбинации с захватывающим антителом, распознающим непересекающийся эпитоп CD45.

CamelBio: ваш единый партнер по поиску сырья

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам упрощенный доступ к высококачественному сырью для ИВД, включая это высококачественное кроличье моноклональное антитело к человеческому CD45. Как единый партнер по закупкам, мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, крупные партии вспомогательных реактивов и можем найти сырье даже для редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших тест-систем — от концепции до клинических испытаний.