Кроличье поликлональное антитело против CD4 для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, IF-P, ELISA - P01730

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация CD4

• CD4 — это 51 кДа интегральный мембранный гликопротеин, также известный как Т-клеточный поверхностный антиген T4/Leu-3, принадлежащий к суперсемейству иммуноглобулинов. Содержит четыре внеклеточных Ig-подобных домена (D1–D4), одну трансмембранную спираль и цитоплазматический хвост, взаимодействующий с Src-киназой LCK.
• В Т-хелперах CD4 функционирует как корецептор для молекул MHC класса II. Он одновременно связывает Т-клеточный рецептор (TCR) и MHC класса II на антиген-презентирующих клетках, рекрутируя LCK для фосфорилирования субстратов TCR-CD3 комплекса, что инициирует сигнальные каскады, ведущие к активации Т-клеток, продукции лимфокинов и пролиферации.
• CD4 критически важен для развития тимоцитов и дифференцировки Т-хелперных клеток. Он также запускает созревание моноцитов в макрофаги, подчеркивая его роль во врожденном и адаптивном иммунитете.
• Помимо Т-клеток, CD4 экспрессируется в макрофагах, дендритных клетках и NK-клетках, где он модулирует дифференцировку, экспрессию цитокинов и миграцию клеток через пути, не зависящие от TCR/LCK.
• CD4 служит основным рецептором для вируса иммунодефицита человека-1 (ВИЧ-1) через свой домен D1, облегчая проникновение вируса. Он также является рецептором для вируса герпеса человека 7 (HHV-7). Инфекция ВИЧ-1 приводит к снижению экспрессии CD4 вирусным белком Vpu. Связанные ссылки: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026, PMID:17346169, PMID:7909607
• Субклеточная локализация преимущественно на клеточной мембране, что соответствует его функции как поверхностного рецептора. Растворимая форма может высвобождаться при активации Т-клеток.
• Высоко экспрессируется в Т-хелперах, но также обнаруживается в других иммунных клетках, таких как макрофаги, дендритные клетки и NK-клетки. Экспрессия CD4 является определяющим маркером для идентификации Т-хелперных клеток.
• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование, дисульфидные связи внутри Ig-доменов и пальмитоилирование цитоплазматического хвоста, что может модулировать локализацию в мембранных микродоменах и передачу сигналов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает внеклеточный домен (аа 26‑200) человеческого CD4, включая сайты связывания MHC класса II и gp120 ВИЧ-1. Такая конструкция может позволить детектировать полноразмерный CD4 в денатурирующем вестерн-блоттинге, а также нативные конформации в иммунофлуоресценции и ELISA.
• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса около 51 кДа в восстановительных условиях. Гликозилирование может приводить к тому, что кажущаяся молекулярная масса будет выше (55–60 кДа). Включайте соответствующие положительные контроли (например, лизаты клеток Jurkat или человеческих PBMC) и рассмотрите использование восстановительного агента.
• Заявленную перекрестную реактивность с мышиным и крысиным CD4 следует проверять в ваших конкретных экспериментальных моделях. Выравнивание последовательностей показывает ~70% идентичности во внеклеточной области; рекомендуется титрование первичного антитела и тщательная валидация.
• Антитело может применяться в форматах непрямой иммунофлуоресценции (IF/ICC) и ELISA. Обеспечьте соответствующие протоколы фиксации и пермеабилизации для IF; для окрашивания поверхности клеток избегайте пермеабилизации. Проводите валидацию на соответствующем типе клеток или ткани.
• При использовании для функциональных исследований (например, блокирования связывания ВИЧ‑1) учитывайте, что поликлональная природа может давать вариабельные результаты; для стабильного блокирования специфичного эпитопа могут быть предпочтительнее моноклональные форматы.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio обеспечивает производителей диагностических средств, исследовательские лаборатории и институты комплексной цепочкой поставок сырья для ИХД. Для разработки иммуноанализов, связанных с CD4 — будь то фенотипирование Т-клеток, исследования ВИЧ или иммунный мониторинг — мы предоставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реагенты оптом. Наша экспертиза в области поставок может ускорить ваш проект от концепции до клиники, включая приобретение сырья для редких мишеней и технические консультации.