Моноклональное антитело к CD4 для проточной цитометрии — P01730

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация CD4

• CD4 представляет собой трансмембранный гликопротеин, относящийся к суперсемейству иммуноглобулинов. Он состоит из внеклеточной области с четырьмя Ig-подобными доменами (D1–D4), однопроходной трансмембранной спирали и короткого цитоплазматического хвоста. В основном экспрессируется на поверхности Т-хелперов, а также на моноцитах, макрофагах, дендритных и NK-клетках.
• В Т-хелперах CD4 выполняет функцию корецептора для молекул MHC класса II. Он связывается с неморфными участками MHC класса II на антигенпрезентирующих клетках, стабилизируя взаимодействие между Т-клеточным рецептором (TCR) и пептид-MHC комплексами — это необходимо для распознавания антигена и активации Т-клеток.
• При активации TCR CD4 рекрутирует киназу семейства Src LCK через свой цитоплазматический хвост в район комплекса TCR-CD3. LCK фосфорилирует иммунорецепторные тирозин-базовые активационные мотивы (ITAM) на цепях CD3, инициируя внутриклеточные сигнальные каскады, которые приводят к пролиферации Т-клеток, продукции цитокинов и дифференцировке.
• Помимо роли в адаптивном иммунитете CD4 выступает основным рецептором для вируса иммунодефицита человека 1 типа (ВИЧ-1) через взаимодействие с оболочечным гликопротеином вируса gp120. Он также служит рецептором для вируса герпеса человека 7 типа (ВГЧ-7). Белки Vpu и Nef ВИЧ-1 снижают экспрессию CD4 на поверхности клетки, облегчая выход вируса и иммунную эвазию. Связанные источники: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607
• CD4 подвергается посттрансляционным модификациям: N-связанному гликозилированию, образованию дисульфидных связей, пальмитоилированию по цистеину в примембранной области и фосфорилированию киназой LCK. Эти модификации регулируют правильную укладку белка, локализацию на мембране и передачу сигнала.
• Экспрессия CD4 является определяющей характеристикой Т-хелперов и часто используется в качестве иммунофенотипического маркера для идентификации субпопуляций Т-клеток. Плотность его на поверхности может изменяться в зависимости от состояния активации и дифференцировки клетки.
• В макрофагах и NK-клетках связывание лиганда с CD4 может запускать дифференцировку, экспрессию цитокинов и миграцию клеток по путям, не зависящим от TCR/LCK, что подчеркивает его функциональную универсальность выходящую за рамки сигналинга в Т-клетках.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело напрямую конъюгировано с — ярким и фотостабильным красно-ближним флуорофором, готово к использованию в проточной цитометрии. Для определения оптимальной концентрации окрашивания для вашего типа клеток и условий эксперимента проведите титрование антитела (типичный диапазон: 0,1–1 мкг на 1×10^6 клеток).
• Поскольку экспрессия CD4 на поверхности покоящихся Т-хелперов высока, обязательно используйте соответствующие изотипные контроли и дифференциацию живых/мертвых клеток для получения специфического окрашивания. Для многоцветных панелей сочетайте антитело с антителами против CD3 и CD8 для детального анализа субпопуляций Т-клеток.
• Антитело перекрестно реагирует с CD4 как человека, так и циномолгуса, поэтому оно подходит для исследований на моделях с нечеловеческими приматами. Если требуется внутриклеточное окрашивание, проведите валидацию антитела для вашей матрицы образца и протокола фиксации/пермеабилизации.
• Иммуногеном является рекомбинантный человеческий CD4, он, вероятно, соответствует внеклеточному домену. Поэтому антитело может преимущественно распознавать нативный, неденатурированный CD4; в денатурирующих условиях (например, вестерн-блоттинг в восстанавливающих условиях) может потребоваться дополнительная валидация.
• Для применений, отличных от проточной цитометрии — таких как иммуногистохимия или иммунопреципитация — из-за отсутствия данных от производителя рекомендуется оптимизация и независимая проверка.

CamelBio: ваш единый мост по снабжению

CamelBio помогает производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям, предлагая широкий ассортимент сырья для ИВД, включая валидированные антитела, пары антигенов и вспомогательные реагенты. Данное антитело к CD4 подходит для иммунофенотипирования Т-клеток и исследований, связанных с ВИЧ, а подтвержденная реактивность с образцами человека и циномолгуса делает его подходящим для разработки трансляционных иммунных анализов. Помимо отдельных реагентов CamelBio помогает с закупкой сырья для редких мишеней и крупных индивидуальных заказов, помогая вам оптимизировать весь рабочий процесс от разработки анализа до клинической валидации.