Кроличье моноклональное антитело против CD16b для WB, FC, ELISA - O75015

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация CD16b

• CD16b (FcγRIIIB) является рецептором с низким сродством к Fc-области иммуноглобулинов гамма, кодируемым геном FCGR3B. Это гликозилфосфатидилинозитол (GPI)-якорный гликопротеин без трансмембранного домена, что отличает его от FcγRIIIA.
• Рецептор связывает комплексированный или агрегированный IgG, а также мономерный IgG, но, в отличие от FcγRIIIA, он не опосредует антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC) или фагоцитоз, вероятно, выступая в качестве рецептора-ловушки, который захватывает иммунные комплексы в периферическом кровотоке без активации нейтрофилов.
• CD16b экспрессируется специфически полиморфноядерными лейкоцитами (нейтрофилами) и стимулированными эозинофилами, что подчеркивает его роль в врожденном иммунном надзоре на гранулоцитах.
• Внутриклеточно CD16b обнаруживается на клеточной мембране и может высвобождаться в секретируемой форме посредством отщепления его GPI-якоря.
• Белок содержит два иммуноглобулиноподобных домена и подвергается обширному гликозилированию; предсказанный молекулярный вес около 26 кДа (основной белок 26 243 Да) часто наблюдается в виде размытой полосы из-за гликозилирования.
• Ключевые структурные особенности включают N-терминальный сигнальный пептид (а.к. 1-18), внеклеточный домен связывания IgG (а.к. 20-208, использованный в качестве иммуногена) и сайт прикрепления C-терминального GPI-якоря. Множественные псевдонимы (CD16, FCG3, FCGR3, FCR-10, FCRIII) отражают историческую номенклатуру.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает весь внеклеточный домен связывания IgG (а.к. 20-208) человеческого CD16b, что хорошо подходит для обнаружения как нативного, так и денатурированного белка в различных применениях.
• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса около 26 кДа в восстанавливающих условиях; может наблюдаться размазывание или диффузная полоса из-за гликозилирования — проверьте с помощью соответствующих положительных контролей (например, лизатов нейтрофилов) и рассмотрите возможность дегликозилирования, если требуется четкая полоса.
• В проточной цитометрии (FC) используйте совместное вторичное антитело, конъюгированное с флуорофором, для обнаружения поверхностного CD16b на живых нефиксированных нейтрофилах; избегайте методов фиксации, которые могут нарушить целостность GPI-якорных белков.
• Для ИФА (ELISA) антитело можно использовать в качестве реагента для захвата или детекции; для сэндвич-форматов рекомендуется использование пары с неконкурирующим клоном анти-CD16b, а условия анализа должны быть оптимизированы с использованием рекомбинантного или очищенного белка CD16b.
• Перекрестная реактивность ограничена человеком; реактивности с мышиным или крысиным CD16b не ожидается, поэтому выберите соответствующую модельную систему или провалидируйте на образцах человека.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям широкий спектр сырья для IVD, от валидированных пар антител и оптимизированных моноклональных антител до вспомогательных реагентов и поиска редких мишеней. Для приложений, связанных с CD16b и биологией Fc-рецепторов, наши услуги по закупкам охватывают оптовые партии этого кроличьего моноклонального антитела, экспертную подборку альтернативных форматов антител и технические рекомендации для оптимизации разработки ваших анализов.