Поликлональные антитела против катепсина K (CTSK) для ВБ и ИФА - P43235

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация катепсина K

• Катепсин K (CTSK), также известный как катепсин O, O2 или X — это лизосомальная цистеиновая протеаза семейства папаина, синтезируемая в виде неактивного зимогена, который подвергается протеолитической активации.
• Он играет ключевую роль в остеокластной резорбции кости, деградируя белки костного матрикса, включая коллаген I типа, и необходим для нормального ремоделирования кости.
• CTSK проявляет выраженную эндопротеазную активность в отношении фибриногена при кислом pH, что указывает на его роль в деградации внеклеточного матрикса не только в костной ткани.
• В щитовидной железе CTSK участвует в высвобождении гормона тироксина (T4) путем ограниченного протеолиза тироглобулина в просвете фолликулов щитовидной железы (PubMed:11082042). Связанные источники: PMID:11082042
• Белок преимущественно экспрессируется в остеокластах (PubMed:7805878) и эпителиальных клетках щитовидной железы (PubMed:11082042). Связанные источники: PMID:7805878, PMID:11082042
• Субклеточно CTSK локализуется в лизосомах, секретируется в межклеточное пространство и может ассоциироваться с апикальной клеточной мембраной в поляризованных клетках.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование и образование дисульфидных связей, важные для стабильности и активности фермента; зрелая форма является гликопротеином.
• Мутации в гене CTSK ассоциированы с пикнодизостозом — аутосомно-рецессивной скелетной дисплазией, характеризующейся повышенной плотностью кости (остеосклерозом).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку иммуноген был получен против рекомбинантного фрагмента (а.о. 115-329), охватывающего зрелый каталитический домен, ожидается, что антитело распознает как проформу, так и активную зрелую форму CTSK в денатурирующих условиях Вестерн-блоттинга (ВБ); однако детекция эндогенного белка может потребовать оптимизации протокола в зависимости от уровня экспрессии в вашей ткани.
• При анализе методом Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать восстанавливающие условия и добавлять ингибиторы протеаз при подготовке образцов, чтобы предотвратить деградацию CTSK. Предсказанная молекулярная масса профермента составляет ~37 кДа, но зрелые расщепленные формы могут иметь меньший размер.
• Подтвержденная перекрестная реактивность с мышью позволяет использовать эти антитела в трансляционных исследованиях на мышах моделях метаболизма кости. Рекомендуется валидировать перекрестную реактивность в вашей конкретной экспериментальной системе.
• Для ИФА рекомендуется использовать это антитело в паре с захватывающим антителом или проводить прямую конъюгацию для детекции; учтите, что для поликлональных антител необходимо проверять консистентность результатов между разными сериями.
• Учитывая, что оптимальная активность CTSK достигается при кислом pH, использование буферов с кислой средой может усилить взаимодействие антитела с антигеном в таких приложениях, как иммуногистохимия или анализ ферментативной активности.

CamelBio: ваша универсальная площадка для поиска сырья

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексную платформу для поиска сырья для ИВД (in vitro диагностики) — от проверки концепции до клинического применения. Для исследований метаболизма кости и протеаз мы предоставляем валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты крупными партиями, чтобы ускорить разработку ваших тест-систем на CTSK. Используйте нашу интегрированную цепь поставок и техническую экспертизу, чтобы получить редкое целевое сырье и оптимизировать ваш рабочий процесс при разработке диагностики.