Кроличья поликлональная антитела против Caspase-8 для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - Q14790

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация Caspase-8

• CASP8 кодирует тиоловую протеазу, которая служит молекулярным переключателем для апоптоза, некроптоза и пироптоза и необходима для предотвращения повреждения тканей во время эмбрионального развития и во взрослом возрасте. Связанные ссылки: PMID:23516580, PMID:35338844, PMID:35446120
• Во внешнем апоптозе CASP8 рекрутируется к рецепторам смерти (FAS/TNFRSF1A) через адаптерный белок FADD, формируя сигнальный комплекс, индуцирующий смерть (DISC), где подвергается протеолитической активации. Связанные ссылки: PMID:8681376, PMID:8681377, PMID:9184224
• Активированная CASP8 расщепляет и активирует нижестоящие эффекторные каспазы (CASP3, CASP4, CASP6, CASP7, CASP9, CASP10), а также BID, связывая сигнализацию от рецепторов смерти с митохондриальным путем апоптоза. Связанные ссылки: PMID:16916640, PMID:8962078, PMID:9006941
• CASP8 также действует как негативный регулятор некроптоза, расщепляя RIPK1 по Asp-324, ограничивая TNF-индуцированный некроптоз и воспаление. Связанные ссылки: PMID:31827280, PMID:31827281
• В пироптозе CASP8 расщепляет гастермин-C и -D (GSDMC, GSDMD), генерируя N-концевые порообразующие фрагменты, которые запускают пермеабилизацию мембраны. Связанные ссылки: PMID:32929201, PMID:34012073
• Субклеточно CASP8 локализуется в цитоплазме, ядре и клеточных выступах, таких как ламеллоподии.
• Изоформы 1, 5 и 7 широко экспрессируются с наибольшим уровнем в лейкоцитах периферической крови, селезенке, тимусе и печени; альтернативно сплайсированные изоформы, лишенные каталитической активности, могут действовать как доминантно-негативные ингибиторы каспазного каскада. Связанные ссылки: PMID:12010809

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует C-концевой области (аа 376–479) человеческой Caspase-8; в Вестерн-блоттинге могут быть обнаружены как полноразмерная форма, так и расщепленные фрагменты — проверьте паттерны полос в вашей экспериментальной системе.
• Для Вестерн-блоттинга ожидайте полосу около 55 кДа для профермента; дополнительные полосы, представляющие активные расщепленные фрагменты, могут появляться при индукции апоптоза.
• При иммуногистохимии (ИГХ-П) рассмотрите возможность антигенного демаскирования с использованием цитратного или Tris-EDTA буфера и оптимизируйте условия блокирования для вашей ткани.
• Для иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) отрегулируйте фиксацию и пермеабилизацию для баланса между доступностью антигена и сохранением морфологии.
• На основании данных производителя ожидается перекрестная реактивность антител с мышиным и крысиным белком; если вы работаете с другими видами, выполните выравнивание последовательностей для подтверждения консервативности эпитопа.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio оптимизирует разработку ИФА-тестов in vitro, предоставляя комплексный портфель высококачественных исходных материалов, включая эти поликлональные антитела против Caspase-8 для исследований апоптоза и клеточной смерти. Будучи вашим партнером для комплексных поставок, мы обеспечиваем доступ к валидированным парам антител, оптимизированным моноклональным и поликлональным антителам, вспомогательным реагентам оптом и поставкам сырья для редких мишеней — поддерживая ваши проекты от концепции до клиники.