Кроличья моноклональная антитела против CAD для WB, IF/ICC, ELISA - P27708

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация CAD

• CAD — это большой мультифункциональный фермент, который катализирует первые три стадии de novo пути биосинтеза пиримидинов: карбамоилфосфатсинтетазу (CPSase), аспартаттранскарбамоилазу (ATCase) и дигидротаазу (DHOase).
• Активность CPSase реализуется через глутамин-зависимый амидотрансферазный (GATase) домен, который генерирует аммиак, используемый синтазным доменом для синтеза карбамоилфосфата из АТФ и бикарбоната.
• Полученный карбамоилфосфат поступает в активный центр ATCase, который катализирует образование карбамоил-L-аспартата из L-аспартата.
• Наконец, домен DHOase циклизует карбамоиласпартат с образованием дигидроорота — предшественника синтеза УМФ.
• CAD локализуется как в цитоплазме, так и в ядре клетки.
• Посттрансляционные модификации CAD включают ацетилирование и фосфорилирование, которые регулируют его активность и поток через метаболический путь.
• Мутации в гене CAD ассоциированы с врожденными нарушениями гликозилирования (CDG1Z) и задержкой развития с эпилептической энцефалопатией (DEE50, EIEE50).
• Молекулярная масса белка составляет примерно 243 кДа, он содержит несколько доменов с сайтами связывания АТФ, ионов металлов (магния, марганца, цинка) и нуклеотидов.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, соответствующий N-концевой области (аа 1–100) человеческого CAD, вероятно, таргетирует домен GATase. Рекомендуется проверять специфичность в релевантных клеточных моделях.
• Для детекции белка 243 кДа методом Вестерн-блоттинга используйте полиакриламидный гель с низким процентом акриламида (например, 6–8%) и увеличенное время переноса, чтобы обеспечить эффективный перенос белка на мембрану.
• При проведении IF/ICC рекомендуется фиксация 4% параформальдегидом и пермеабилизация 0,1% Тритоном X-100 для детекции пула белка как в цитоплазме, так и в ядре.
• В ИФА антитело можно использовать в прямом или сэндвич-формате; в качестве положительного контроля добавьте иммуногенный пептид.
• Эндогенная экспрессия CAD варьируется в зависимости от типа клеток; проводите валидацию антитела в вашей экспериментальной системе, например, в клетках HeLa или HEK293.
• Перекрестная реактивность с видами, отличными от человека, не определена; при работе с нечеловеческими образцами рекомендуется проводить выравнивание последовательностей.

CamelBio: Ваш мост для универсального снабжения

CamelBio предлагает производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям широкий выбор сырья для производства ИВД, включая высококачественные моноклональные антитела против CAD. Независимо от того, нужны ли вам валидированные пары антител, крупные объемы вспомогательных реагентов или помощь в разработке анализов метаболизма пиримидинов, CamelBio предоставляет надежные решения снабжения от концепции до клинических испытаний. Наши возможности поставки охватывают широкий спектр мишеней: у нас вы можете в одном месте получить оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, сырье для редких мишеней и индивидуальную техническую консультацию.