Кроличья поликлональная антитело против BPI для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - P17213

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация BPI

• Бактерицидный проницаемости увеличивающий белок (BPI) представляет собой секретируемый гликопротеин массой 53,9 кДа, принадлежащий к суперсемейству BPI/LBP/Plunc, также известный как CAP 57. У человека он кодируется геном BPI.
• BPI оказывает мощное антимикробное действие, избирательно воздействуя на многие грамотрицательные бактерии, связываясь с высоким сродством с липополисахаридами (LPS) в наружной мембране бактерий, что приводит к проницаемости мембраны и гибели бактерий.
• В частности, рекомбинантный BPI демонстрирует антибактериальную активность против Pseudomonas aeruginosa, и эта активность нейтрализуется избытком LPS того же организма, что подтверждает LPS-зависимое нацеливание.
• Белок локализуется преимущественно в мембране цитоплазматических гранул в миелоидных клетках и секретируется при активации нейтрофилов, играя критическую роль в защите врожденного иммунитета.
• Экспрессия в тканях ограничена клетками миелоидного ряда, включая нейтрофилы и моноциты, что соответствует его функции в ранней защите хозяина от бактериальной инфекции.
• Посттрансляционные модификации включают образование дисульфидных связей и гликозилирование, как указано в ключевых словах UniProt, что, вероятно, важно для структурной стабильности и активности.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 248–487 в пределах C-концевой области человеческого BPI. Эта область отличается от N-концевого домена связывания LPS, что потенциально позволяет распознавать как полноразмерный BPI, так и C-концевые фрагменты.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рассмотрите использование восстановительных и невосстановительных условий для оценки миграции, зависящей от дисульфидных связей, поскольку BPI содержит множество дисульфидных связей, которые могут влиять на видимую молекулярную массу.
• В применениях ИФА (ELISA) антитело может быть пригодно для обнаружения нативного или рекомбинантного BPI в растворе; однако оптимальные условия покрытия и разведения антител следует определять эмпирическим путем.
• Учитывая экспрессию, ограниченную миелоидными клетками, проверьте специфичность антитела в соответствующих линиях клеток положительного контроля (например, дифференцированные HL-60 или первичные нейтрофилы) и включите контроли с нокаутом или блокирующие пептиды, где это возможно.
• Перекрестную реактивность с мышиным BPI (предполагаемую) следует подтвердить экспериментально в целевой системе образцов, поскольку гомология последовательностей в области иммуногена может варьироваться.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio выступает в качестве комплексной универсальной платформы для закупки сырья для IVD, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реактивы оптом и разработку на заказ по редким мишеням. Для исследователей и производителей, работающих над мишенями врожденного иммунитета и антимикробными белками, такими как BPI, CamelBio предоставляет эффективные пути закупок и технические консультации, упрощая переход от исследовательской концепции к клиническому применению. Сотрудничайте с нами, чтобы обеспечить высококачественные реактивы, адаптированные к вашим потребностям в разработке диагностических тестов.