Поликлональные антитела к бета-2-микроглобулину для Вестерн-блоттинга, ИГХ (Парафин), ИФА - P61769

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация бета-2-микроглобулина

• Бета-2-микроглобулин (B2M) является легкой цепью главного комплекса гистосовместимости класса I (MHC I), необходимой для презентации пептидных антигенов CD8+ Т-клеткам, тем самым играя критическую роль в адаптивном иммунитете.
• Это секретируемый белок, который также обнаруживается на поверхности клетки в нековалентной связи с тяжелой цепью MHC I; его сворачивание и сборка являются ключевыми для стабильной экспрессии MHC I.
• Экзогенный белок EsxA Mycobacterium tuberculosis связывается с B2M и снижает его экспорт на поверхность клетки, что потенциально нарушает презентацию антигенов класса I (PubMed:25356553).
  Связанные ссылки: PMID:25356553
• Структурно B2M содержит иммуноглобулиноподобный домен и стабилизируется внутримолекулярной дисульфидной связью (Cys25-Cys80). Это гликопротеин, который подвергается посттрансляционным модификациям, включая гликирование и образование N-терминального пироглутамата.
• Мутации в гене B2M связаны с семейной гиперкатаболической гипопротеинемией и амилоидозом, при этом он может образовывать фибриллярные отложения в тканях, особенно при диализ-ассоциированном амилоидозе.
• Несмотря на небольшой размер (теоретически ~13,7 кДа), бета-2-микроглобулин на SDS-PAGE в восстанавливающих условиях мигрирует с массой примерно 14 кДа.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген соответствует зрелой секретируемой форме (аминокислоты 21-119), исключая сигнальный пептид; антитела могут распознавать как восстановленный, так и невосстановленный B2M, но для стабильных результатов проводите валидацию в денатурирующих и восстанавливающих условиях (например, нагревание при 95°C с DTT) для разрушения дисульфидных связей.
• Для Вестерн-блоттинга загружайте 10–30 мкг общего лизата клеток или концентрированной сыворотки и используйте положительный контроль, такой как ткань, богатая лимфоцитами (селезенка, лимфатический узел), или клеточные линии, экспрессирующие MHC I.
• При иммуногистохимии на срезах из парафинированных блоков (ИГХ-П) проводите демаскировку антигенов с цитратным буфером (pH 6,0) или буфером EDTA (pH 9,0) и рассмотрите проведение титрационного эксперимента для оптимизации интенсивности окрашивания.
• Антитела перекрестно реагируют с B2M мыши и крысы, что делает их подходящими для грызуновых моделей; проверьте гомологию последовательностей и протестируйте соответствующие тканевые лизаты для подтверждения видовой реактивности.
• Для ИФА они могут использоваться в качестве захватывающих или детектирующих антител; сочетание с другим клоном, распознающим другой эпитоп, может повысить чувствительность в сэндвич-анализах. Оптимизируйте буферы для покрытия и коэффициенты разведения.
• В связи с секрецией B2M можно анализировать бесклеточные образцы; для низкоабундантных мишеней может потребоваться обогащение путем иммунопреципитации или концентрирования.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, исследовательским лабораториям и академическим учреждениям упрощенный доступ к премиальным реагентам для IVD. Для проектов, сосредоточенных на биологии MHC класса I, иммунном надзоре или амилоид-ассоциированных заболеваниях, наш портфель включает валидированные антитела к бета-2-микроглобулину, рекомбинантные белки и совместимые вторичные реагенты. Независимо от того, требуются ли вам большие объемы этих поликлональных антител или специализированная техническая поддержка, наша команда готова помочь вам ускорить разработку ваших анализов от концепции до клиники.