Поликлональное кроличье антитело против AUH для Вестерн-блота, ИФА - Q13825

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация AUH

• Ген AUH кодирует метилглутаконил-КоА-гидратазу — митохондриальный фермент, также известный как АУ-специфичная РНК-связывающая эноил-КоА-гидратаза. Он выполняет двойную функцию в катаболизме лейцина и метаболизме РНК.
• Катализирует гидратацию 3-метилглутаконил-КоА до 3-гидрокси-3-метилглутарил-КоА (ГМГ-КоА) в пути деградации лейцина, что является ключевым этапом синтеза кетоновых тел (PubMed:11738050, 12434311, 12655555, 16640564).
  Связанные источники:
  PMID:11738050 PMID:12434311 PMID:12655555 PMID:16640564
• В условиях in vitro проявляет более широкую субстратную специфичность, включая глутаконил-КоА, кротонил-КоА и 3-метилкротонил-КоА, хотя и с более низкой аффинностью (PubMed:16640564).
  Связанные источники:
  PMID:16640564
• Связан с АУ-богатыми элементами (ARE) в мРНК, что указывает на его роль в регуляции стабильности и деградации мРНК (PubMed:7892223).
  Связанные источники:
  PMID:7892223
• Может функционировать как итаконил-КоА-гидратаза в пути катаболизма C5-дикарбоксилатов, детоксифицируя противомикробный метаболит итаконат, продуцируемый макрофагами (PubMed:29056341).
  Связанные источники:
  PMID:29056341
• В основном локализуется в митохондриальном матриксе, что соответствует его метаболическим функциям.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, кроме того, для белка характерен альтернативный сплайсинг, что расширяет его функциональное разнообразие.
• Генетические варианты AUH связаны с развитием заболеваний, что подчеркивает его клиническое значение.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Используемый иммуноген соответствует аминокислотам 68–339 человеческого AUH и покрывает большую часть зрелого белка. Это может способствовать узнаванию как нативных, так и денатурированных конформаций белка в различных применениях.
• При Вестерн-блоттинге ожидается полоса с массой около 36 кДа (или 35,6 кДа согласно данным UniProt). Для проверки специфичности полосы используйте лизаты, обогащенные митохондриями, или клеточные линии с подтвержденной экспрессией AUH в качестве положительного контроля.
• При проведении ИФА стратегией захвата может быть прямое покрытие планшета рекомбинантным белком AUH или фрагментом иммуногена. При разработке сэндвич-ИФА рассмотрите возможность использования детектирующего антитела, узнающего отдельный эпитоп.
• Для подтверждения специфичности к мишени рекомендуется сиРНК-опосредованный нокдаун или CRISPR-нок-аут гена AUH в релевантных клеточных линиях для наблюдения за исчезновением сигнала при ВБ.
• Учитывая высокую гомологию последовательности между AUH человека, мыши и крысы, антитело может проявлять перекрестную реакцию с этими видами. При работе с нечеловеческими системами всегда валидируйте реактивность на пробах, полученных от соответствующего вида.

CamelBio: ваша универсальная платформа поиска реагентов

CamelBio предлагает широкий ассортимент сырья для производства ИВД и решения по поиску реагентов для научных и диагностических сообществ, включая ключевые метаболические мишени, такие как AUH. Наше портфолио включает валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и индивидуальный поиск редких мишеней. Для исследователей, разрабатывающих анализ, нацеленный на митохондриальный метаболизм или РНК-связывающие белки, мы предоставляем надежный доступ к высококачественным реагентам и технические консультации.