Поликлональное антитело против ATP6V1E1 для WB, IF/ICC, ELISA — P36543

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация ATP6V1E1

• Ген ATP6V1E1 кодирует субъединицу E1 V-тип протоинной АТФазы, также известную как субъединица V-АТФазы с молекулярной массой 31 кДа (p31), субъединица E1 вакуолярной протонной помпы и ATP6E/ATP6E2. В результате альтернативного сплайсинга может образовываться несколько изоформ.
• Являясь субъединицей периферического комплекса V1 V-АТФазы, он участвует в гидролизе АТФ для обеспечения транслокации протонов через мембраны, что приводит к подкислению внутриклеточных компартментов, таких как лизосомы, эндосомы и секреторные везикулы (PubMed:32001091, PubMed:33065002). Связанные источники: PMID:32001091 PMID:33065002
• V-АТФаза также локализуется на плазматической мембране некоторых типов клеток, участвуя в подкислении внеклеточного пространства и регуляции рН (PubMed:32001091). Связанные источники: PMID:32001091
• Комплекс V-АТФаза действует как активатор mTORC1 на мембране лизосом, способствуя активности гуаниннуклеотидобменного фактора (GEF) комплекса Ragulator, тем самым стимулируя рекрутинг mTORC1 и анаболическое сигналинг (PubMed:22053050, PubMed:39695235). Связанные источники: PMID:22053050 PMID:39695235
• Внутриклеточно ATP6V1E1 обнаруживается на апикальной клеточной мембране, мембранах цитоплазматических везикул (синаптические везикулы, клатрин-покрытые везикулы) и мембране лизосом.
• Белок экспрессируется повсеместно, с высоким уровнем в почках (особенно в дистальном нефроне), коже и определяется в большинстве тканей организма (PubMed:29993276, PubMed:12036578, PubMed:28065471). Связанные источники: PMID:29993276 PMID:12036578 PMID:28065471
• Согласно протеомным исследованиям, посттрансляционные модификации включают ацетилирование и фосфорилирование, которые могут регулировать сборку комплекса или его активность.

Экспериментальное руководство и технические рекомендации

• Иммуноген соответствует аминокислотной последовательности 77-226 человеческого ATP6V1E1 — эта область хорошо консервативна у разных видов, что объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность с белками мыши и крысы.
• При вестерн-блоттинге ожидается полоса с молекулярной массой около 26 кДа. Рекомендуется использовать подходящие положительные контроли, такие как лизаты HeLa или ткани почек, а также включать отрицательный контроль.
• При иммунофлуоресценции/ИКК антитело должно распознавать V-АТФазу в везикулярных структурах и, возможно, на плазматической мембране. Рекомендуется оптимизация условий пермеабилизации и фиксации для каждого типа клеток.
• Для применения в ELISA в качестве покрывающего антигена можно использовать рекомбинантный иммуноген или фрагменты пептида; рекомендуется предварительная валидация антитела в выбранном формате анализа.
• Будучи поликлоральным антителом, оно может распознавать несколько изоформ, образующихся в результате альтернативного сплайсинга; это свойство является преимуществом при определении общего уровня ATP6V1E1.
• Хотя производитель указывает на перекрестную реактивность с мышами и крысами, рекомендуется провести индивидуальную валидацию в вашей конкретной системе образцов из-за возможных видоспецифических различий в доступности антигена.

CamelBio: ваш универсальный мост для поиска реагентов

В CamelBio мы соединяем производители диагностических тестов и исследовательские лаборатории с высококачественным сырьем для *in vitro* диагностики. Это поликлоральное антитело против ATP6V1E1 является примером нашей приверженности поддержке исследований V-АТФазы и транспорта ионов с помощью надежных инструментов. Помимо отдельных антител, мы предлагаем валидированные пары антител, крупные партии вспомогательных реагентов и индивидуальный поиск реагентов для редких мишеней, чтобы оптимизировать разработку ваших анализов.