Кроличье поликлональное антитело Anti-ATP6V0A1 для WB, IF/ICC, ELISA - Q93050

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация ATP6V0A1

• ATP6V0A1 кодирует субъединицу a1 массой 116 кДа V0-домена вакуолярной H+-АТФазы (V-АТФазы) — многосубъединичного фермента, перекачивающего протоны через клеточные мембраны. Связанные ссылки: PMID:33065002, PMID:33833240, PMID:34909687

• Эта субъединица необходима для транспорта протонов в такие органеллы, как лизосомы, эндосомы, транс-сеть Гольджи и синаптические везикулы, поддерживая кислый pH просвета, необходимый для деградации белков, транспорта рецепторов и загрузки нейромедиаторов.

• V-АТФаза действует как активатор mTORC1 на мембранах лизосом, стимулируя активность фактора обмена гуаниновых нуклеотидов (GEF) комплекса Ragulator и рекрутируя mTORC1 на поверхность лизосом. Связанная ссылка: PMID:22053050

• В нейронах ATP6V0A1 играет критическую роль в развитии и формировании связей; мутации с потерей функции связаны с развивающейся и эпилептической энцефалопатией и интеллектуальной недостаточностью. Связанная ссылка: PMID:33833240

• Белок локализуется в мембранах везикул, покрытых клатрином, синаптических везикул и меланосом, а также может экспортироваться на плазматическую мембрану специализированных клеток для закисления внеклеточной среды.

• ATP6V0A1 подвергается альтернативному сплайсингу и содержит несколько участков N-гликозилирования и фосфорилирования, которые могут регулировать его стабильность и функцию.

Рекомендации по проведению экспериментов и технические советы

• Поскольку иммуноген соответствует цитоплазматическому участку (аминокислоты 60–300), данное поликлональное антитело может эффективно выявлять как нативный, так и денатурированный ATP6V0A1 в вестерн-блоттинге (WB). Можно ожидать полосу вблизи расчетной массы 96 кДа; также возможны дополнительные полосы, обусловленные посттрансляционными модификациями или изоформами.

• При проведении иммунофлуоресценции (IF/ICC) антитело может визуализировать ATP6V0A1 во внутриклеточных везикулярных компартментах, таких как эндосомы и лизосомы. Совместное окрашивание с маркерами органелл может подтвердить локализацию.

• Для ELISA возможна прямая или непрямая детекция рекомбинантных или очищенных фрагментов белка ATP6V0A1. Для оптимизации соотношения сигнал/шум подберите титр антитела и используйте подходящие блокирующие буферы.

• Подтвердите специфичность антитела, включив в эксперимент лизаты положительного контроля (например, HeLa, U2OS) и отрицательный контроль (клетки с нокаутом или обработанные siRNA).

CamelBio: универсальный источник необходимых реагентов

CamelBio предоставляет производителям средств для in vitro диагностики и исследовательским лабораториям комплексные решения по подбору реагентов, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реагенты для различных диагностических применений. Данное поликлональное антитело Anti-ATP6V0A1 поддерживает исследования функций вакуолярной АТФазы, биологии лизосом и заболеваний нервного развития — областей, в которых CamelBio может поставлять соответствующие реагенты и оказывать консультационную поддержку.