Рекомбинантное моноклональное кроличье антитело Anti-ATP6AP1 для WB, IHC-P, ELISA — Q15904

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация ATP6AP1

• ATP6AP1 (субъединица S1 протонной АТФазы V-типа), также известный как Ac45, XAP-3 или ATP6S1, является вспомогательной субъединицей комплекса V0 вакуолярной H⁺-АТФазы (V-АТФазы). Этот мультисубъединичный фермент связывает гидролиз АТФ комплексом V1 с транслокацией протонов комплексом V0, обеспечивая закисление внутриклеточных компартментов. Связанные публикации: PMID:28296633 PMID:33065002
• Помимо закисления, комплекс V-АТФазы действует как лизосомальный активатор mTORC1, стимулируя активность фактора обмена гуаниновых нуклеотидов (GEF) комплекса Ragulator и тем самым способствуя рекрутированию mTORC1. Связанные публикации: PMID:22053050
• ATP6AP1 направляет V-АТФазу в специализированные субклеточные компартменты, такие как нейроэндокринные секреторные везикулы и гофрированная кайма остеокластов, регулируя её активность. Он также участвует в мембранном транспорте и Ca²⁺-зависимом слиянии мембран. Связанные публикации: PMID:27231034
• В аэробных условиях ATP6AP1 участвует в поддержании внутриклеточного гомеостаза железа, что запускает активность Fe²⁺-зависимых пролилгидроксилаз (PHD), приводя к гидроксилированию HIF1A и последующей деградации в протеасомах. Связанные публикации: PMID:28296633
• Белок локализуется в мембране эндоплазматического ретикулума, промежуточном компартменте ЭР—аппарата Гольджи и различных цитоплазматических везикулах, включая секреторные, синаптические и покрытые клатрином везикулы.
• Экспрессируется широко; самые высокие уровни отмечаются в мозге, а самые низкие — в печени и двенадцатиперстной кишке, что соответствует его роли в регулируемой секреции и внутриклеточном транспорте.
• Мутации в ATP6AP1 связаны с врождёнными нарушениями гликозилирования (CDG), что подчёркивает его важность для процессинга гликопротеинов.

Рекомендации по проведению экспериментов и технические советы

• Иммуноген (N-концевой пептид, аминокислоты 1–100) нацелен на участок, консервативный у человека и мыши, что обеспечивает перекрёстную реактивность. Проводите валидацию на соответствующих образцах с использованием положительных контролей (например, лизата ткани мозга), где уровень экспрессии высок.
• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса приблизительно на уровне 52 кДа. Начните со стандартных разведений IgG и оптимизируйте их экспериментально. Для подтверждения специфичности рекомендуется использовать отрицательный контроль (например, лизат после нокдауна с помощью siRNA или лизат нокаутных клеток).
• Для иммуногистохимии (IHC-P) рассмотрите этапы демаскировки антигена и проведите тестирование на фиксированных формалином и залитых парафином срезах тканей, в которых, как известно, экспрессируется ATP6AP1, например мозга или поджелудочной железы.
• В ELISA антитело можно использовать в качестве реагента для захвата или детекции; однако применение в паре с другим клоном может повысить чувствительность. Подберите концентрации антител методом титрования, чтобы установить оптимальный динамический диапазон.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по подбору материалов

CamelBio помогает производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям ускорить разработку программ IVD, предоставляя единый доступ к высококачественному сырью, включая валидированные пары моноклональных/поликлональных антител и вспомогательные реагенты в больших объёмах. Для мишеней, подобных ATP6AP1, играющих центральную роль в биологии V-АТФазы, функционировании лизосом и мембранном транспорте, мы можем организовать индивидуальное производство антител, поиск реагентов для редких мишеней и технические консультации. Независимо от того, требуется ли вам оптимизированное антитело для конкретного применения или помощь в разработке анализа, CamelBio помогает преодолеть путь от концепции до клинического применения.