Кроличья поликлональная антитела против ATG4D для WB, IF/ICC, ELISA - Q86TL0

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация ATG4D

• ATG4D — это цистеиновая протеаза, которая играет ключевую роль в аутофагии, опосредуя как протеолитическую активацию, так и делипидацию белков семейства ATG8. Она расщепляет C-концевую аминокислоту MAP1LC3 и GABARAPL2, обнажая остаток глицина, необходимый для конъюгации с фосфатидилэтаноламином (ФЭ) и встраивания в мембрану. Связанные источники: PMID:21177865
• Помимо протеолитической активации, ATG4D катализирует делипидацию белков ATG8, конъюгированных с ФЭ, во время макроаутофагии и белков ATG8, конъюгированных с фосфатидилсерином (ФС), при неканонической аутофагии, являясь основной делипидазирующим ферментом среди членов семейства ATG4. Связанные источники: PMID:29458288, PMID:33909989
• ATG4D участвует в росте фагоры во время митофаггии независимо от его протеазной активности, регулируя транспорт ATG9A к митохондриям и способствуя контактам фагоры с эндоплазматической сетью во время переноса липидов. Связанные источники: PMID:33773106
• Этот белок действует как регулятор аутофагии, связывающий митохондриальную дисфункцию с апоптозом; его импорт в митохондрии при клеточном стрессе и дифференцировке влияет на физиологию митохондрий, уровень АФК, митофаггию и жизнеспособность клеток.
• Субклеточно ATG4D локализуется в цитоплазме и митохондриальном матриксе, что соответствует его двойной роли в регуляции аутофагии и митохондрий.
• Он экспрессируется широко, с заметной экспрессией в яичках, и подвергается альтернативному сплайсингу. Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области (аминокислоты 1-230) человеческого ATG4D. При работе с образцами учитывайте, что эта область может быть консервативна у разных изоформ или видов, и соответственно валидируйте паттерны полос.
• При вестерн-блоттинге (WB) предсказанная молекулярная масса составляет примерно 53 кДа, но эндогенный ATG4D может подвергаться протеолитической обработке или модификациям; валидируйте размеры полос с использованием подходящих положительных контролей и лизатов человеческих или мышиных клеток.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) оценивайте паттерны окрашивания цитоплазмы и митохондрий. Для детекции митохондриально локализованного ATG4D может потребоваться оптимизация условий фиксации и пермеабилизации.
• При применении в ELISA антитело можно использовать для детекции рекомбинантного или эндогенного ATG4D; строите стандартные кривые с известными концентрациями антигена и учитывайте перекрестную реактивность с родственными членами семейства ATG4 при мультеплексном анализе.

CamelBio: Ваш единый центр закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и исследовательским институтам унифицированный доступ к сырью для ИВД, техническим услугам и консалтингу, охватывая все этапы от концепции до клинических испытаний. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела как эта ATG4D pAb, крупные объемы вспомогательных реагентов и поиск сырья для редких мишеней. Исследователи, изучающие пути аутофагии и митохондриальные pathways могут рассчитывать на CamelBio для комплексной поддержки закупок и надежных поставок.