Кроличьи моноклональные антитела против ATG4B для ВБ, ИФ, ИЭИА — Q9Y4P1

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация ATG4B

• ATG4B (также известный как APG4B, AUTL1, аўтофагин-1) — ключевая цистеиновая протеаза, регулирующая аутофагию путем опосредованного протеолитического процессинга и де-липидирования белков семейства ATG8. Она незаменима для макроаутофагии, неканонической аутофагии и митофании. Связанные источники: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651, PMID:33773106, PMID:33909989

• ATG4B расщепляет C-концевые аминокислоты гомологов ATG8 (MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2), что приводит к обнажению консервативного глицина — обязательного условия для конъюгации гомологов с фосфатидилэтаноламином (ФЭ) и их встраивания в мембраны аутофагосом. Связанные источники: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• ATG4B также действует как де-липидирующий фермент, деконъюгирующий ФЭ с белков ATG8 для облегчения их рециклинга; дополнительно она процессингует белки ATG8 на одномембранных структурах при неканонической аутофагии. Связанные источники: PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:29458288, PMID:33909989

• При митофании ATG4B способствует росту фагофора независимо от своей протеазной активности за счет регуляции траффика ATG9A к митохондриям и обеспечения контактов ЭПР с фагофором для переноса липидов. Связанные источники: PMID:33773106

• Среди четырех маммалийских паралогов ATG4 (ATG4A–D) ATG4B является основной протеазой для активации ATG8, но проявляет относительно низкую де-липидирующую активность по сравнению с ATG4A и ATG4D. Связанные источники: PMID:29458288, PMID:30661429

• Субклеточно ATG4B локализуется в цитоплазме, цитозоле, аутофагосомах, эндоплазматической сети и митохондриях, что соответствует его многосторонней роли в аутофагии и связанных с ней путях.

• Сообщается о посттрансляционных модификациях ATG4B, включая ацетилирование, фосфорилирование, S-нитрозилирование и гликирование, которые потенциально регулируют его ферментативную активность и субклеточное распределение.

Рекомендации по эксперименту и технические советы

• Иммуноген соответствует пептиду в области остатков 200–300 человеческого ATG4B, эта область находится в каталитическом домене. На реактивность антитела могут влиять посттрансляционные модификации или конформационные состояния белка.
• При вестерн-блоттинге ATG4B мигрирует с массой примерно 44 кДа. Эндогенный уровень белка может варьироваться; для улучшения детекции рекомендуется использовать индукторы аутофагии (например, голодание, рапамицин).
• В иммунофлуоресцентных исследованиях ATG4B показывает пунктирную цитоплазматическую распределение, которая может колокализовать с маркерами аутофагосом (например, LC3) и митохондриальными маркерами в условиях индукции митофании. Рекомендуется валидация специфичности на нокаутных клеточных линиях.
• Сообщается о перекрестной реакции антитела с ATG4B мыши и крысы; для других видов рекомендуется проверить выравнивание последовательности области иммуногена.
• Для количественного определения можно использовать иммуноферментный анализ; рекомендуется использовать формат сендвич-ИФА с подобранной парой антител.

CamelBio: ваш универсальный поставщик сырья

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов и лабораториям универсальный доступ к высококачественному сырью для ИВД и комплексную техническую поддержку, ускоряя продвижение ваших проектов от концепции до клиники. Обладая экспертизой в области исследования аутофагии и митохондрий, CamelBio предлагает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты в больших объемах, адаптированные под потребности разработки ваших тест-систем. Полагайтесь на наши специализированные услуги по поиску и консалтингу для получения редких мишеней и оптимизации процесса закупок.